Question

【题目】科学工作者通过基因工程创造出了“蜘蛛羊，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答:

（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从_____(填“基因组”或“cDNA ”)文库中获取，并与_____等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过_________方法，将表达载体导入羊的_____，获得重组细胞。

（2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过_____________处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加_________。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将胚胎发育到_____期进行_____处理。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”(已知表达载体已进入细胞)乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用_____技术来检测。

Answer 1

【答案】cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 同期发情 动物血清(动物血浆) 桑椹胚或者囊胚 胚胎分割 分子杂交

【解析】

基因工程的操作步骤：获取目的基因；构建基因表达载体；把目的基因导入受体细胞；目的基因的检测和鉴定。

（1）cDNA文库不含有内含子等序列，故为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从cDNA文库中获取，并与羊的乳腺蛋白基因的启动子（可以保证目的基因在乳腺表达）等调控组件重组在一起，构建成表达载体；需要选择羊的受精卵作为受体细胞，通过显微注射法将目的基因导入受体细胞。

（2）为了保证胚胎移植成功，需要对供受体进行同期发情处理。在早期胚胎的培养中，往往还需要添加血清、血浆等天然成分。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可通过胚胎分割处理发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚期的胚胎，需要注意将内细胞团分割均匀。

（3）若蜘蛛羊目的基因已经进入受体细胞，但没有检测到蛛丝蛋白，目的基因合成蛛丝蛋白需要经过转录和翻译过程，为判断问题所在，需要通过分子杂交法检测目的基因是否转录出相应的RNA，若有杂交带出现，说明翻译阶段出问题；若无杂交带出现，说明转录阶段出问题。