Question

【题目】某研究小组为了研究蚯蚓体表分泌液中含有的多种抗菌肽类对土壤微生物是否具有抑制作用，进行了相应实验。请回答下列问题：

（1）称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水和_______________制作固体培养基，并用______________________法灭菌后，倒平板，获得固体培养基。

（2）获得土壤沥出液后，利用__________________法将沥出液均匀地接种在培养基上。

（3）利用平板打孔法将蚯蚓体表分泌液注入平板上分散的孔中，在适宜的条件下培养一段时间后，结果如下图所示。实验结果是平板上注入了蚯蚓体表分泌液的孔周围没有菌落，实验结论是________________________

（4）将土壤沥出液接种到以纤维素为唯一碳源的含有蚯蚓体表分泌液的培养基上，培养后用刚果红染色。结果发现绝大部分菌落周围出现不变红的透明圈，这说明__________________。

（5）科学家使用_______________法分离分泌液中不同分子量的抗菌肽类，最先分离出来的是___________的肽类。

Answer 1

【答案】琼脂 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板 蚯蚓体表分泌液对土壤微生物具有抑制作用 蚯蚓体表分泌液对土壤中的纤维素分解菌无抑制作用 凝胶色谱 分子量大

【解析】

本题以蚯蚓的分泌液对土壤微生物生命活动的影响为背景，考查了微生物的分离和培养、微生物数量的测定等知识，同时要求学生掌握相关的操作技能，并能将实验涉及的原理、方法和技能等迁移运用。 微生物培养过程中需使用不同的鉴别方法。

（1）制作固体培养基时用到琼脂，培养基只能用高压蒸汽灭菌。

（2）将沥出液均匀地接种在培养基上用稀释涂布平板法。

（3）蚯蚓体表分泌液周围没有微生物说明蚯蚓体表分泌液对土壤微生物具有抑制作用。

（4）纤维素鉴别培养基上加入蚯蚓体表分泌液，结果还有透明圈产生，说明分解纤维素的微生物不受蚯蚓体表分泌液的影响。

（5）凝胶色谱法用来分离蛋白质时首先分离出来的时分子量大的物质，大分子物质不进入凝胶分子内部，首先洗脱出来。