题目内容

【题目】萌发的小麦种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活.某生物兴趣小组设计了“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验。

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等.

实验步骤:

步骤一:制作麦芽糖梯度液.取7支干净的具刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列。

步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。

步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管

步骤四:另取四支试管,编号A、B、向A试管中加入2mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖),向B 试管加入等量蒸馏水,再同时置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将A、B试管中的溶液分别加入5ml40℃的5%淀粉溶液,摇匀后继续保温10min.

步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入C、D试管,然后向C、D试管分别加入 ,再置于60℃水浴加热2min后观察颜色变化.

结果将C试管中颜色与 进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率.

请分析回答:

(1)“步骤三”中补充的内容是______________________________

(2)“步骤五”中补充的内容是______________________________

(3)“结果分析”中补充的内容是________________________

(4)步骤一的1、4、7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是______________单位:ML).

(5)实验中B 试管起__________________作用,具体是检测实验使用的淀粉溶液是否存还原性糖。

(6)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需要步骤_______________________进行改变。

【答案】置于70℃水浴中15min,取出后冷却 2mL斐林试剂 第一步中获得的麦芽糖显色标准液 2.0mL、1.0mL、0mL 对照

【解析】

本题以图表的形式考查酶的特性及鉴定实验,旨在考查考生的信息获取的能力与综合运用能力,解题关键是明确两种淀粉酶的作用特点及失活因素,进而作答。

(1)因为本实验的目的是“测定小麦种子中α-淀粉酶的催化效率”,β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活,以排除β-淀粉酶对实验结果的干扰;

(2)步骤五:斐林试剂可在水浴加热的条件下鉴定还原糖的存在,所以步骤五的做法中要补上2mL斐林试剂;

(3)结果将C试管中颜色与第一步中获得的麦芽糖显色标准液进行比较,以此获得该试管中麦芽糖浓度,即可计算出α-淀粉酶催化效率;

(4)实验设计要遵循对照原则和单一变量原则,所以各个试管中液体的总量要相等,则步骤一的1、4、7试管中加入蒸馏水的量(XYZ)分别是2mL、1.0mL、0mL;

(5)实验中B试管起对照作用,具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖;

(6))若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤三进行改变,具体操作可以是将装有淀粉酶溶液在pH调至3.6以下,使α-淀粉酶失活。

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