Question

【题目】下图1是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；下图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图。回答下列问题：

（1）图1、图2的培养结果显示，两实验中使用的均为________(填物理状态）培养基。

（2）在配制图2中的培养基时，除考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”）种类的抗生素。在配制培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的有__________(填序号：①酒精灯，②接种环，③培养皿）。

（3）培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。适用于图1、图2所示培养基的灭菌方法是_______；接种前还需检测灭菌效果，方法是将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上________________。

（4）实验证明，上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低，为获得图1、图2所示的培养结果，一是要设法提高图1中S型菌的_________；二是要使用恰当的方法接种。两实验都不能用稀释涂布平板法接种，而应采用菌液直接涂布平板和影印法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，理由是__________。接种培养4天后，可通过观察菌落的形态特征来识别肺炎双球菌和大肠杆菌。

Answer 1

【答案】 固体 不同 ② 高压蒸汽灭菌 是否有菌落产生 DNA纯度 稀释会导致菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落

【解析】

据图分析，图1中R型菌的培养基中加入了R型菌和S型菌DNA，结果是培养基上同时出现了R型菌和S型菌，说明S型菌DNA将R型菌转化为S型菌；图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图，培养基B中应该加入了相应的抗生素检测重组质粒是否导入了受体细胞，结果是1、2、3生存下来了，而4消失了，说明前三者导入了重组质粒，而后者没有。

（1）从图1、图2可以看出，两实验中使用的都是固体培养基。

（2）要检测重组质粒是否导入大肠杆菌，检测的依据一般是重组质粒的抗性发生了改变，因此在培养基A和培养基B中应加入不同种类的抗生素。在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，不需要接种环（②）。

（3）对培养基灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法；接种前需要检测灭菌效果，其方法是进行空白对照，将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（4）上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低，为获得图1、图2所示的培养结果，一是要提高图1 中S型菌的DNA纯度；二是要使用恰当的方法接种，不选用平板划线法和稀释涂布平板法，而采用不加稀释的涂布平板法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，是因为这两种方法都可能因稀释后菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落。