题目内容
【题目】将鼠的精子在保存液内与含有A基因的重组质粒保温30 min，然后用于人工授精，共培育出127只小鼠。待小鼠生长至适宜大小时，对其中的36只进行PCR和DNA分子杂交检测。结果表明，有6只携有A基因的转基因鼠，且体型大约为普通鼠的2倍。请回答下列有关问题：
（1） A基因（目的基因）表达效果与________基因相同。
（2）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR 技术的原理是___，该反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液、____、___、Taq 酶、引物等；引物应选用下图中的_____（填图中标号）。
（3）检测A基因是否转录出mRNA时，需要用_________做探针，再与相应的物质杂交。
（4）在胚胎移植前对胚胎进行了检查和筛选，发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡，外源基因插入导致胚胎死亡的原因可能是_______________。
【答案】生长激素 DNA双链复制 模板DNA dNTP（四种脱氧核苷酸或脱氧核糖核苷三磷酸） A、D 放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段 外源基因的插入导致胚胎正常发育所需的基因不能表达
【解析】
1、PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核苷酸；⑤耐热的DNA聚合酶；⑥温控设备。
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）题干信息中“转入A基因的老鼠的体型大约为普通老鼠的2倍”，说明A基因（目的基因）表达效果与生长激素基因相同。
（2）PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA双链复制。PCR反应体系包含缓冲液、Taq酶、原料（四种脱氧核苷酸或脱氧核糖核苷三磷酸）、引物以及模板（模板DNA）；引物应选用图中的A和D。
（3）检测目的基因是否转录出mRNA时，需要用标记的目的基因片段（放射性同位素标记）做探针，再与相应的物质杂交。
（4）胚胎移植前对胚胎进行了检查和筛选，发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡，可能原因是外源基因的插入导致胚胎发育所需的正常基因不能表达。
【题目】斑蝥素具有良好的抗肿瘤活性。下列是斑蝥素的一种合成路线：
已知：ⅰ.其它条件不变，通常反应物浓度越大速率越快，多步反应时速率由最慢反应决定；
ⅱ.当用A1=B1和A2—B2分别表示分子中含有双键的有机化合物和试剂时，可用下面的式子来表示加成反应的一般结果：
酮与HCN或NaCN加成历程表述如下：
ⅲ.HCN为弱酸
（1）有机化合物A的分子式为______。
（2）A转化为B时，路线Ⅰ和路线Ⅱ均在水溶液中进行。实验发现：路线Ⅰ比路线Ⅱ所需时间短，试解释原因______。
（3）写出B→C的化学方程式______。
（4）D与乙二醇（HOCH2CH2OH）发生缩聚反应的化学方程式为______。
（5）①F的分子式为：C10H8O4S，则E→F的反应类型为______。
②下表研究了______对合成F的影响，合成F的较优条件为______（填编号）。
编号 | 离子液体 | 反应温度/℃ | 反应时间/h | E含量/% | F含量/% |
1 | [BPy] BF4 | 45 | 20 | 90 | 9 |
2 | [HMIM]PF6 | 35 | 20 | 5 | 93 |
3 | [BMIM]BF4 | 25 | 30 | 0 | 90 |
4 | [HMIM]BF4 | 35 | 20 | 38 | 57 |
5 | [BMIM]BF4 | 35 | 20 | 0 | 86 |
（6）请写出以
为原料制备
的合成路线流程图______（无机试剂任选，合成路线流程图示见本题题干）。
