题目内容
【题目】以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料：
A．核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。
B．核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在， DNA核蛋白在1mol·L-1 NaCl溶液中溶解度很大，但在0.14mol·L-1 NaCl溶液中的溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0.14mol·L-1 NaCl溶液。
C．用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入2.5倍体积，浓度为95％的酒精，可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠，可用玻棒搅成团取出。
D．DNA在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。
E．实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.015mol·L-1 NaCl溶液、1mol·L-1 NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95％酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
F．实验步骤：研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物 →沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定
请阅读以上材料回答下列问题：
（1）研磨时，取10g花椰菜，加适量的石英砂和____________ 、____________；
（2）将滤液稀释6倍，其目的___________________________________________；
（3）离心后得的沉淀物主要是：_____________________________；
（4）取沉淀物，置于2mL 1mol·L-1 NaCl 溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2mL苯酚充分震荡后静止，待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去__________；
（5）如何将剩余溶液中的DNA提取出来? _________________________________；
（6）如何证明提取物确实是DNA分子? ___________________________。
【答案】柠檬酸钠溶液 1mol·L-1 NaCl溶液 降低溶液浓度，降低DNA的溶解度，使DNA充分沉淀 DNA蛋白质 蛋白质 缓缓地加入2.5倍体积，浓度为95％的酒精，可将DNA分离出来 取两支试管，各加入0.015mol·L-1 NaCl溶液5mL，并将上述提取物放入其中一支试管中，用玻棒搅拌，使之溶解。再向两支试管中各加入4mL二苯胺，置于沸水浴中，加热5min，发现加入提取物的这支试管溶液呈蓝色，即能证明提取物为DNA
【解析】
DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性；（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
（1）研磨时，加入少量的石英砂是为了增大摩擦，加入研磨的速度，加入1mol·L-1 NaCl溶液是为了溶解核DNA，加入柠檬酸钠溶液是为了保护DNA不被破坏。
（2）在0.14mol·L-1 NaCl溶液中，DNA核蛋白质溶解度最少，所以要将1mol·L-1 NaCl溶液稀释，使DNA核蛋白质析出。
（3）离心后得的沉淀物主要是：DNA蛋白质。
（4）前一步提取的是DNA核蛋白，而需要的是DNA，因此需要把DNA核蛋白进一步提纯。用苯酚处理，可使蛋白质变性，而且留在苯酚层内，用这样的方法可以去除蛋白质。
（5）根据题中所给的信息，在DNA溶液中加入2.5倍体积，体积分数为95%乙醇，可将DNA分离出来，可用搅拌成团取出。
（6）取两支试管，各加入0.015mol·L-1 NaCl溶液5mL，并将上述提取物放入其中一支试管中，用玻棒搅拌，使之溶解。再向两支试管中各加入4mL二苯胺，置于沸水浴中，加热5min，发现加入提取物的这支试管溶液呈蓝色，即能证明提取物为DNA。
