题目内容

【题目】请回答与“固定化酶”实验有关的问题:

(1)—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产,_______是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用__________培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后,成为_______且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时,在装柱后需要用_________缓慢冲洗,直至流出液不使淀粉-碘混合液发生___________为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入,再在下端接取少量流出液进行KI-I2颜色测试,结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是___________

A.反应柱中没有—淀粉酶被固定

B.流速过快淀粉未被水解

C.接取的流出液是蒸馏水

D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

【答案】 单菌落分离 液体 不溶于水 10倍体积蒸馏水 褪色 D

【解析】试题分析:固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。在催化反应中,它以固相状态作用于底物,反应完成后,容易与水溶性反应物和产物分离,可被反复使用。

(1)单菌落的分离是筛选高表达菌株的最简便方法之一;筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用液体培养基进行扩大培养。

(2)—淀粉酶在水溶液中很不稳定,且不利于工业化使用,常用固定化技术使之成为不溶性于水而又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时,在装柱后需要用蒸馏水缓慢冲洗,所用的蒸馏水体积为装填体积的10倍,直至流出液不使淀粉-碘混合液发生褪色为止。

(3)根据题干信息分析,将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入,再在下端接取少量流出液进行KI-I2颜色测试,结果不呈现红色,说明仍然有淀粉存在,可能是由于反应柱中没有—淀粉酶被固定,导致淀粉没有被水解,A正确;也可能是流速过快,导致淀粉未被水解,B正确;也可能接取的流出液是蒸馏水,C正确;淀粉溶液经过α‐淀粉酶后的水解产物是糊精,不是葡萄糖,D错误。

练习册系列答案
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【题目】回答下列(一)、(二)小题:

(一)某同学用新鲜的泡菜汁为实验材料分离纯化出乳酸菌,用来生产酸奶。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用__________对泡菜汁进行梯度稀释,然后采用__________法进行分离,可获得乳酸菌的单菌落。

(2)推测分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有____________________。分离纯化时应挑选出__________的菌落作为候选菌。

(3)获得纯化的乳酸菌后,可以利用纯牛奶作为原料制作酸奶,发酵常在__________(A.有氧+常温 B.无氧+常温 C.有氧+低温 D.无氧+低温)条件下进行。如果使用的是加了某些抗生素的纯牛奶作原料制酸奶,很有可能会发酵成怪味“酸奶”,其原因可能是__________

(二)科学家用转基因方法培育“巨型小鼠”。图1为含大鼠生长激素基因的DNA及限制酶切割位点示意图;图2为含有相应标记基因和限制酶切割位点的质粒示意图,其中nptII为卡那霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,复制原点是质粒上必需的一段复制起始的序列,与重组质粒的自主复制有关。图3是转基因过程中的一个步骤。

(1)根据图1,在获得目的基因时,应使用限制酶__________PvuⅠ / EcoRⅠ)进行切割。可以选择图2中的质粒__________(A / B)作为目的基因的载体,理由是__________

(2)图3表示基因工程中将重组DNA分子导入受体细胞的过程,该步骤采用的技术方法是__________,通常选择__________作为受体细胞。

(3)获得含目的基因的细胞后,该细胞需要进行__________。然后再进行移植,通常移植最适宜的时期是发育到__________(A.2细胞胚胎 B.4细胞胚胎 C.早期囊胚 D.原肠胚)。再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。

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