题目内容

【题目】用同位素35S和32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA,然后用标记的噬菌体侵染大肠杆菌,进入大肠杆菌体内的是

A. 35SB. 32PC. 35S和32PD. 35S和32P都不进入

【答案】B

【解析】

本题考查噬菌体侵染细菌实验,要求考生识记噬菌体的结构及化学组成,掌握噬菌体的繁殖过程,明确噬菌体侵染细菌时只有DNA进入细菌,再根据题干要求作出准确的判断,属于考纲识记和理解层次的考查。

噬菌体侵染细菌时,只有DNA进入细菌中,蛋白质外壳留在细菌外。因此,用同位素35S和32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA,然后用标记的噬菌体做侵染大肠杆菌的实验,进入细菌体内的成分只有32P。综上可知, B正确,ACD错误。故选B。

练习册系列答案
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【题目】回答下列(一)、(二)小题:

(一)黄素单加氧酶(FMO)是转化吲哚合成靛蓝(一种染料)的一种重要的酶。为提高表达FMO的重组大肠杆菌合成靛蓝的效率,对重组菌进行了固定化研究。回答下列问题:

1)重组大肠杆菌的扩大培养:用_______________________挑取大肠杆菌单菌落接种于LB液体培养基中,放在______________________ 填设备)上培养过夜,将过夜培养物1mL转移至100mL LB液体培养基中继续培养。该过程所用培养基对于酸碱度的要求是_________________

2)重组大肠杆菌的固定化:分别使用卡拉胶、明胶、聚乙烯醇(网格较紧密,扩散性能最低)、海藻酸钠对重组大肠杆菌进行________ (填固定化方式)并分析各自对_________的转化效率。

3)靛蓝取转化液5mL,离心后,沉淀部分用于靛蓝分析。沉淀用蒸馏水洗两遍,再用NN-二甲基甲酰胺溶解,再离心,取上清液于610nm处测定OD值,和________________对照即得到靛蓝浓度。若所测得的OD值过大应采用的最佳措施是________________________

4)影响重组大肠杆菌转化吲哚合成靛蓝效率的因素有很多,如:工程菌FMO诱导表达的条件、固定化颗粒的理化性质、反应时间、pH、温度、辅助因子的再生、________________________________(答出2 点即可)等。

(二)对疑似PRRS(猪繁殖与呼吸综合征)的病料(从得病的动物身上采集的组织或器官)进行病毒分离鉴定,获得一株高致病性PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒) ,通过对高致病性PRRSVN蛋白进行研究来探讨该蛋白的抗原特性,并制备抗N蛋白的单克隆抗体。回答下列问题:

1PRRSV N 蛋白基因的克隆:提取PRRSV中的总RNA,以其中相应的RNA作为模板,利用________________酶逆转录成cDNA。再以cDNA为模板进行________________扩增,而获得N蛋白基因。

2)表达N蛋白细胞的制备:用重组质粒________________合适的大肠杆菌细胞,为提高该过程的效率,需考虑重组质粒的___________________________等。将筛选过的受体细胞 37℃过夜培养。

3)单克隆抗体的制备与检测:取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合待融合细胞生长到培养孔底面积的1/10时进行________________________(填物质)筛选。检出的阳性孔用有限稀释法进行多次克隆化,建立单克隆抗体________________。最终获得的单克隆抗体是否达到实验要求的标志是_________________________,与无关蛋白不发生反应。

4)猪干细胞的应用:胚胎干细胞可以进行________________________________,获得适合猴子移植的猪器官,减弱或消除排斥反应。

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