Question

【题目】尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学_________（填“能”或“不能”）分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是________________________________________。

（2）接种前要对培养基进行___________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_______条件下进行。

（3）一位同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_________________，应当怎样操作才可以避免此种现象？______________________________________。

（4）获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在___________培养基上，等长成菌落后放在4 ℃的冰箱中保存。若要长期保存，可以采用___________的方法。

Answer 1

【答案】不能 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源 灭菌 无菌 菌液浓度过高 对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数） 固体斜面 甘油管藏

【解析】

根据题表中培养基配方可知，蛋白胨和尿素可提供氮源，葡萄糖可提供碳源，含有琼脂，故该培养基为固体培养基；尿素分解菌体内的脲酶能够将土壤中的尿素分解为氨，尿素分解菌属于细菌，筛选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基。

（1）由图中培养基的配方可知，该培养基中能提供氮源的是蛋白胨和尿素，尿素不是唯一氮源，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨为氮源生长，所以不能分离出分解尿素的菌。

（2）微生物筛选与分离成功的关键是无菌操作，因此，接种前要对培养基进行灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。

（3）培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液没有梯度稀释，浓度过高；要避免此种现象，需要对菌液进行梯度稀释。

（4）获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在固体斜面培养基上，等长成菌落后放在4 ℃的冰箱中保存。若要长期保存，可以采用甘油管藏的方法。