题目内容
【题目】泡菜与酸奶均采用乳酸菌进行发酵。现有研究人员打算从泡菜中获取可用于酸奶发酵的乳酸菌菌种，其操作如下：
（1）使用_________________法将少量泡菜汁接种于培养基上，经厌氧培养后得到图示结果。
（2）将上述培养基中各菌落转移至MRS-碳酸钙固体培养基（配置方法为将MRS培养基冷却至45～50℃时，加入已灭菌的碳酸钙，充分混匀，倒平板）中，厌氧培养48小时后，发现有部分菌落的周围出现透明圈，其原因是________________________________________。
（3）将上述培养基中具有透明圈的菌落，转入MRS液体培养基中发酵48小时后，进行纸层析后显色处理，得到下图实验结果（A为1．5％乳酸标样，其余为不同菌种发酵液），则下列菌种属于乳酸菌的是________________________。
（4）在鲜奶中加入上述菌种进行发酵后会出现固形物凝聚成团的现象，推测出现该现象的原因是____________________________________________。
（5）因为菌种相同，部分研究人员猜测制作酸奶的过程中可能会产生亚硝酸盐，进而测出酸奶中的亚硝酸盐含量为1mg／kg。于是他们认为制作酸奶的过程中会产生亚硝酸盐，但是另一些研究人员认为这个结论不可靠，其理由是_____________________________。请给出改进实验的思路，以进一步确定此结论的可靠性：
方案改进：______________________________________________________。
预期结果和结论：若___________________________________________，则说明酸奶发酵过程中会产生亚硝酸盐。
【答案】稀释涂布平板 细菌代谢产生的酸性物质分解碳酸钙，形成透明圈 B、C、D 上述菌种发酵过程中产生的乳酸，降低了pH，使得其中的蛋白质的空间结构被破坏而凝聚成团 亚硝酸盐可能来自于原料（鲜奶） 增设一组实验，测定鲜奶中的亚硝酸盐的含量 酸奶中亚硝酸盐含量高于鲜奶中亚硝酸盐含量
【解析】
据题文的描述和图示分析可知：该题考查学生对实验室中微生物的纯化培养的方法及其分离等相关知识的识记和理解能力，以及能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力并能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订能力。
(1) 根据培养的效果图可以判断：将少量泡菜汁接种于培养基上的接种方法是稀释涂布平板法。
(2) 在加入CaCO3的MRS培养基中培养从泡菜汁中分离出来的各菌落，由于细菌代谢产生的酸性物质能够分解培养基中的碳酸钙，所以会在菌落周围形成透明圈。
(3) 将上述周围有透明圈的菌落转入MRS液体培养基中发酵48小时后，进行纸层析后显色处理，其结果如图所示。已知A为1.5％乳酸标样，B～E为不同菌种发酵液，其中的B、C、D均出现了与A相同的显色结果，说明B、C、D菌种的发酵产物中均含有乳酸，因此都属于乳酸菌的菌种。
(4) 在鲜奶中加入上述菌种（乳酸菌）进行发酵后会出现固形物凝聚成团的现象，究其原因是：上述菌种在发酵过程中产生的乳酸降低了奶液的pH，使得其中的蛋白质因空间结构被破坏而凝聚成团。
(5) 在酸奶中检测出含有亚硝酸盐，该亚硝酸盐的来源可能是在制作酸奶的过程中产生的，也可能是来自于原料（鲜奶）。由于在制作酸奶之前没有对鲜奶中是否含有亚硝酸盐进行检测，所以依据检测的结果得出“制作酸奶的过程中会产生亚硝酸盐”的结论是不可靠的。若要确定此结论的可靠性，需增设一组实验，测定鲜奶中的亚硝酸盐的含量。若测定结果为酸奶中亚硝酸盐含量高于鲜奶中亚硝酸盐含量，则说明酸奶发酵过程中会产生亚硝酸盐。
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