Question

【题目】萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α 淀粉酶和α 淀粉酶。α 淀粉酶耐热不耐酸；β 淀粉酶耐 酸不耐热，70 ℃处理 15 min 即变性失活。为测定萌发种子中 α 淀粉酶和 β 淀粉酶活性的差异，将发芽 3 天的大麦种子加蒸馏水研磨匀浆、离心取上清液得到淀粉酶提取液，进行如下实验。

操作步骤		1号试管	2号试管	3号试管
①	加淀粉酶提取液	1mL	1mL	1mL
②	预处理	70℃恒温水浴15min， 取出冰浴中冷却	高温使α 淀粉酶 和α 淀粉酶失活	不处理
③	加缓冲液	2mL	2mL	2mL
④	预保温	40℃恒温水浴lOmin
⑤	加40℃预热的 淀粉溶液	2mL	2mL	2mL
⑥	保温	40℃恒温水浴5min
⑦	测定	加入试剂5065℃水浴5min，测定砖红色沉淀物的量

回答下列问题：

(1)步骤⑦中加入的试剂 X 为______。

(2)上述实验操作步骤中，步骤②中对 1 号试管进行操作的目的是_____；为达成实验目的，设置的 1、2、3 号试管中，为对照组的一组是______号试管。

(3)通过上述实验，能大致比较萌发 3 天时种子的 α-淀粉酶和 β-淀粉酶活性的大小。比较的方法 是______。

Answer 1

【答案】斐林试剂 使β-淀粉酶变性失活 2 测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大

【解析】

本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异；萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶耐热不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃

处理15min即变性失活。若测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率，因此要根据β-淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干扰。淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定。

（1）本实验的目的是测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异，淀粉酶分解淀粉为还原糖，还原糖可以用斐林试剂进行鉴定，步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂。

（2）β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活。上述实验操作步骤中，步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β-淀粉酶变性失活，测定大麦种子中α-淀粉酶催化效率，为达成实验目的，设置的1、2、3号试管中，为对照组的一组是2号试管（2号试管α-淀粉酶和β-淀粉酶均失活，不能将淀粉变为还原糖，2号和1号对比能测定α-淀粉酶催化效率）。

（3）通过上述实验，可以测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大，从而能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小。