题目内容
7、Ti质粒上有T—DNA，这种DNA可以转移到受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。这种质粒存在于
A．大肠杆菌 B．农杆菌 C．酵母菌 D．苏云金芽孢杆菌
试题答案
7、B
（11分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取。基因文库包含 和 等类型，其中前者的基因中含有启动子。
（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是 类化合物。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA 的特点。
（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是 （任举一例）。
（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用 、 技术。
（5）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加 。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的 （填相应基因的简写字母），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是 。
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（16分）Ⅰ.（8分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒，它是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题：
（1）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即祛除瘤基因，将抗旱基因转移至________，然后在一定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。以上过程需要的工具有 。
（2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成________ ，通过产生不定芽再长出整个植物。
（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在________水平对转基因植物与非转基因植物进行比较。
Ⅱ．（8分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。
（1）图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中不含有引物B的DNA片段所占的比例为 。
②在第 轮循环产物中首次出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
（2）PCR反应体系中含有的DNA聚合酶具有
特点，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为
。
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