32.(9分)(注意:在试题卷上作答无效。)
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
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限制酶 |
BamHⅠ |
Hind Ⅲ |
EcoRⅠ |
SmaⅠ |
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识别序列及 切割位点 |
GGATCC CCTAGG |
AAGCTT TTCGAA |
GAATTC CTTAAG |
CCCGGG GGGCCC |
下图是转基因抗病香蕉的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
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⑴用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是________。
⑵构建含目的基因的重组质粒A时,选用___________________________(限制)酶对________________________________________进行切割,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
⑶香蕉组织细胞具有_______________,因此,可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的______________、__________________。
⑷培养皿中的培养基除添加营养物质外,还需要添加___________,其目的是诱导外植体完成①、②生理过程,培养成完整的植物体。