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植物体细胞杂交 |
动物细胞融合(单克隆抗体制备) |
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理论基础 (原理) |
细胞膜的流动性、 细胞的全能性 |
细胞膜的流动性、 细胞增殖 |
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融合前 处理 |
酶解法去除细胞壁 (纤维素酶、果胶酶) |
注射特定抗原免疫处理正常小鼠 |
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促融 |
(1)物理法:电刺激等 (2)化学法:聚乙二醇(PEG) |
(1)物化法:与植物细胞融合相同 (2)生物法:灭活的仙台病毒 |
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过程 |
第 一 步 |
原生质体 的制备 (酶解法) |
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正常小鼠 的免疫 处理 |
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第 二 步 |
原生质体 融合 (物化法) |
动物细胞 融合(物 化生法) |
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第 三 步 |
杂种细胞 的筛选 与培养 |
杂交瘤细 胞的筛选 与培养 |
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第 四 步 |
杂种植株 的诱导 与鉴定 |
单克隆 抗体的 提纯 |
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优点 |
克服植物远缘杂交不亲和的障碍 |
从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中 获得单抗 |
[基础训练]
1、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( B )
A、将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B、用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C、用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D、筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体