2．有一瓶混有酵母菌的葡萄糖培养液，当通入不同浓度的氧气时，其产生的C₂H₅OH和CO₂的量如下表所示。通过对表中数据分析可得出的结论是 　　　 (　　 )

　　 A．a浓度时酵母菌有氧呼吸速率等于无氧呼吸速率

　　 B．b浓度时酵母菌有氧呼吸速率大于无氧呼吸速率

　　 C．c浓度时有50%的葡萄糖用于酵母菌的酒精发酵

　　 D．d浓度时酵母菌只进行有氧呼吸未进行无氧呼吸

1．人体内的细胞外液构成了细胞生活的液体环境，在这个环境中可发生许多生化反应，其中有　　　　　　 (　　 )

A．蛋白质消化分解成氨基酸　　　　　

B．神经递质和激素的合成

　　 C．丙酮酸氧化分解成二氧化碳和水　　

　　 D．乳酸与碳酸氢钠作用生成乳酸钠和碳酸

15．I．为加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法：

请据图的信息回答：

(1)试管牛与克隆牛的培育过程中均用到的细胞工程技术有　　　　　　　　　　

(2)用来促进B牛多排卵的激素是　　 　　分泌的促性腺激素，E牛的性别是　　　 　

(3)产生F牛的生殖方式属于　　 　　　　。

(4)要培养高产奶率的转基因牛，一般将目的基因导入的受体细胞是　　　　 ；导入常用 　　　　　　　　法　　　 　　　；如果要获得能表达出人干扰素(一种淋巴因子)的目的基因，则需要从人体的哪种细胞中获得？　　　 　　　。

II． 科学家利用细胞工程培育了“白菜-甘蓝”杂种植株，如下图所示，请根据图回答下列问题：

(1)图C表示　　　　　　　　　 ；由D形成E的过程称为　　　　　　 ，涉及的细胞代谢类型为　　　　　　　　　 ；由E形成F的过程中细胞的增殖方式为　　　　　　 。

(2)图中A、B的制备，需要去除细胞壁，此时要用到　　　　　　　　　　　　 酶；从根本上讲， “白菜-甘蓝”杂种植株性状的出现是由于　　 　　　　　　　　　　　　的结果。

(3)“白菜-甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜-甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。

①取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜-甘蓝”植株甲上，再取等量的、生活状态基本一致的昆虫幼虫放在　　　　　　　　　 植株乙上。

②适宜条件下培养一段时间后，分别观察　　　　　　　　　　　　　　 的生活情况。

③若　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　，说明甲植株的抗虫基因未得到表达；

若　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，说明甲植株的抗虫基因得到表达。

Ⅲ．进行植物体细胞杂交，首先需要除去细胞壁以获得原生质体，这是植物细胞杂交能否成功的关键环节。现提供以下材料和用具：白色洋葱鳞片叶、紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的盐酸、适宜浓度的蔗糖液、纤维素酶、果胶酶、蒸馏水和镊子，显微镜、载玻片、盖玻片等。请你从中选取合适的材料配制成合理的细胞壁分解液，并设计出检验它除去细胞壁的方法和步骤，预测和解释实验的结果。

(1)实验步骤：

①配制细胞分解液：选取　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 配制成细胞壁分解液。这样选取的理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

②检验细胞壁分解液除去细胞壁的方法：

(2)实验结果的预测和解释：

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　。

[[解题思路]

Ⅰ题用文字图解展示考查试管牛与克隆牛的异同点。由图，试管牛的产生是经过精子和卵细胞结合成受精卵，再由受精卵发育而来的，因而它的产生属于有性生殖，克隆牛则是由C牛体细胞的核与卵细胞的细胞质组合形成的。就后代的性别而言，动物E可能是雄性，也可能是雌性，动物F的性别则与提供细胞核的动物个体相同，因为决定后代性别的染色体全部来自细胞核；但是两者在培育过程中均用到了动物细胞培养和胚胎移植技术。

Ⅱ题主要考查植物体细胞杂交中的基本知识。D→E是组织、器官和细胞脱分化的过程，其形成的愈伤组织不能进行光合作用，所需营养来自于培养基，故为异养需氧型。

[答案]

I (1)动物细胞培养、胚胎移植 (2)垂体；雌性或雄性 (3)无性生殖

(4)受精卵；显微注射器　 效应T细胞

II (1)正在融合的原生质体　 脱分化(去分化)异养需氧型　 有丝分裂(2)纤维素酶和果胶酶　 基因选择性表达。(3)①长势相似的普通“白菜-甘蓝”。　 ②(两植株上的)昆虫幼虫。③甲、乙植株上昆虫幼虫正常生活；甲植株上昆虫幼虫死亡，乙植株上昆虫幼虫正常生活。

Ⅲ(1)①适宜浓度的蔗糖液，加入适量的纤维素酶和果胶酶

　　 纤维素酶和果胶酶能高效、专一地水解细胞壁，适宜浓度的蔗糖液不会使原生质体过度吸水而胀破而且对细胞无毒害作)

　　 ②第一步：滴适量的细胞壁分解液在载玻片水中央，用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶表皮浸泡在其中。一段时间后，制得实验组装片。

　　 第二步：用适宜浓度的蔗糖液替代细胞分解液，其它操作与制作实验组装片相同，制得对照组装片。

　　 第三步：在显微镜下观察比较实验组装片和对照组装片。

　 (2)实验组装片的洋葱细胞呈分散的紫色球形，表明细胞壁已被分解掉。对照组装片的洋葱细胞呈相互连接的紫色多边形，表明细胞壁未被分解。

14．下图表示了人、鼠细胞融合过程。分别将带有绿色荧光能与人细胞膜上HLA抗原特异结合的抗体和带有红色荧光能与小鼠细胞膜上H-2抗原特异结合的抗体放入细胞培养液，对人、鼠细胞进行标记。请回答：

(1)实验结果可以直接证明细胞膜上_________可以运动，融合的基本原理是___________。

(2)融合时常常用到灭活的病毒作为诱导剂。从分子水平解释灭活的病毒作用的机理_____

______________________________________________________________________。

(3)选取不同生物细胞进行融合是因为___________________________________________。要使实验现象明显，可以适当提高细胞培养液的____________。

(4)细胞培养液中通常含有无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸和_____________等，融合中可以形成________种融合细胞，融合细胞含有___________个染色体组。

(5)培养人细胞与小鼠细胞的融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中，不合理的是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(　　 )　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　A．与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变

　B．研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术

　C．在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组

　 D．这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系

[解析] 考查动物细胞培养的基本知识。选用不同细胞融合是因为不同生物细胞表面抗原差异较大，从而使试验效果更明显； 在融合细胞中，与人或小鼠细胞相比，染色体数目有所变化，发生了染色体变异，而非DNA重组。

[答案](1)蛋白质分子　 细胞膜的流动性 (2)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂类分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合　 (3)不同生物细胞表面抗原差异较大　 温度　　　　

(4)动物血清　　　 3　　　 4　　 (5)C　

13．(2009· 福建理综)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

　 (1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶　 　　　　　　　　　　，

对　 　　　　　　　　　　　　　进行切割。

　 (2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有　　 　　　　　　，作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有　　　　　　　 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的　 　　　　　　。

[解析]本题考查基因工程的有关知识。⑴从图可看出，只有PstⅠ、EcoRⅠ两种酶能保持抗病基因结构的完整性，所以构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ两种酶，对抗病基因的DNA和质粒进行切割。⑵卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，以此作为标记基因。⑶香蕉组织细胞具有全能性，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化。

[答案](1)PstⅠ、EcoRⅠ　 含抗病基因的DNA 、质粒　 (2)抗卡那霉素基因

(3)　　　 全能性　 脱分化、再分化

12．回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1) 在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的　　　　　 。此时，瓶壁上形成单层细胞，这种单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。

(2) 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得　　　　　 ，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上　　　　　 　

　　　　　 　　减少，导致细胞间的黏着性　　　　　 。

(3) 在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加　　　　　 ，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入　　　　　　　　　　　 等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O₂和CO₂，其中O₂的作用是　　　　　　　　　　　 ，CO₂的作用是　　　　　　　　　　　　 。

(4)动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大，判断的依据是　　　　　　　　　　　　　 　　。

[解析] 本题主要考查动物细胞培养的相关知识，属识记内容。

[答案]⑴ 接触抑制　 ⑵ 不死性　 糖蛋白 降低　 ⑶ 抗生素　 血清、血浆　 提供细胞进行有氧呼吸　 维持培养液的pH　 ⑷ 物质的毒性越大，越容易导致细胞发生变异

11．(2009·山东) 人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传

染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答：

(1)过程①代表的是　　　　 。

(2)过程②构建A基因表达载体时，必须使用　　　　　　　 和　　　　　 两种工具酶。

(3)过程③采用的实验技术是　　　　 ，获得的X是　　　　　　 。

(4)对健康人进行该传染病免疫预防时， 可选用图中基因工程生产的　　　　　 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒， 与已知病毒进行　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　 比较；或用图中的　　　　　　　　　　　 进行特异性结合检测。

[解析](3)过程③是将瘤细胞与B淋巴细胞融合的过程，获得的叫杂交瘤细胞，其具备了

瘤细胞的无限增殖的特性和B淋巴细胞的产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体。

(4)题干中指出该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产

的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的

比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体，通过能否

特异性结合来判断病毒表面是否有A蛋白的存在，进一步进行检测是否为目的RNA病毒。

[答案](1)逆转录　 (2)限制性核酸内切酶(限制酶、限制性内切酶)　 DNA连接酶(两

空可以互换)　 (3)细胞融合　 杂交瘤细胞　 (4) A蛋白　 核酸(基因)序列　 抗A蛋

白的单克隆抗体

10．小鼠体细胞含40条染色体，用小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，然后放入被³⁵P标记的培养液中培养，当杂交瘤细胞进入有丝分裂后期时，其含有的被³⁵P标记的染色体条数是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　(　 )

A．40　　 　 　　　　　B．80　　 　　　 　　　C．120　 　　 　　　　D．160

[解析] 本题考查的是细胞融合的实质。小鼠的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞都应该是40条染色体，这样融合后的杂交瘤细胞应该含有80条染色体，当杂交瘤细胞进入有丝分裂后期时，染色体应该是160条。

　 [答案] D

9．玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家在玉米育种中和栽培中作了大量的研究。如图是关于玉米培养的过程，据图判断下列说法中错误的是　 ( 　 )

A．从繁殖原理上分析，A→D属于无性生殖。

B．植株D和G中的染色体组数不同

C．E→G不能体现细胞的全能性

D．E→F过程中获得的植株一般没有直接的使用价值即应用于大田生产。

[解析] E→G是植物组织培养过程，同属于无性繁殖，也体现了细胞的全能性。D植株取材于由受精卵发育而成的玉米幼苗，为二倍体，其花药中花粉只含一个染色体组，由它通过无性繁殖发育成的G为单倍体，故两者染色体数不同；E→F过程中获得的植株不能产生有功能的配子，即无法形成种子繁殖下一代，故没有直接的使用价值。

　 [答案]C 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

8．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成为“复生”野驴的方法是　 ( 　 )

A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体

B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体

C．取出野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体

D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体

[解析] 动物细胞的全能性受到限制，A、B在现代技术条件下通过组织培养还无法实现。 通过基因工程只能保存个别基因，不能保存物种。

　 [答案]C