34.(16分)分析下面两道与基因工程有关的问题

Ⅰ.2007年我国科学家率先完成了家蚕(ZW型性别决定)基因组精细图谱的绘制,将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上,请回答以下有关家蚕遗传变异的问题:

(1)在家蚕的基因工程实验中,分离基因的做法包括用  对DNA进行切割,然后将DNA片段与  结合成重组DNA,并将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等。

(2)家蚕的体细胞共有56条染色体,对家蚕基因组进行分析(参照人类基因组计划要求),应测定家蚕  条双链DNA分子的核苷酸序列。

(3)决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对,其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质,该序列叫     ;剩下的序列最多能编码   个氨基酸(不考虑终止密码子),该序列叫     。

(4)家蚕的胚胎发育按顺序主要包括哪些阶段      。

Ⅱ.下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P为启动因子(具有与RNA聚合酶结合的位点),T为终止子(转录终止位点),ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有    、    、   三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行          。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是         。若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是            .

(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是   ,其合成的产物是    。

(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶时           。

 0  186755  186763  186769  186773  186779  186781  186785  186791  186793  186799  186805  186809  186811  186815  186821  186823  186829  186833  186835  186839  186841  186845  186847  186849  186850  186851  186853  186854  186855  186857  186859  186863  186865  186869  186871  186875  186881  186883  186889  186893  186895  186899  186905  186911  186913  186919  186923  186925  186931  186935  186941  186949  447090 

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