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回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。(10分)
2006年12月22日,我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
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63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术?
利用了哪些原理? (本题答案从下列所给选项中选择填写)
①转基因技术;②细胞核移植技术;③胚胎移植技术;④干细胞技术;⑤动物细胞培养技术
⑥基因突变;⑦基因重组;⑧动物细胞核具有全能性;⑨动物细胞具有全能性
64、过程①②中必需用到的酶分别是 和 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组,原因是 。
65、早期胚胎的培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及 等物质。
通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的,要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应(如下图所示)中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下,发挥延伸DNA子链的作用,将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答:
PCR(DNA聚合酶链式反应)技术示意图:
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66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的?
A.水母细胞 B.猪胎儿成纤维细胞 C.极端嗜热菌 D.大肠杆菌
67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能,为什么? 。
68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒,得到DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。(2分)
(1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用____培养。
(2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是___。
(3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:
②.图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的_______、聚乙二醇或电激等诱导。
③.特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有_________等优点。
(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有__________________。
(5)单克隆抗体的制备还有哪些用途?________________。
科学家从某些无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)。该基因能激发许多动物细胞的分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景.请回答以下相关问题:
(1)prG的结构上能编码氨基酸的部位叫________.
(2)利用细胞融合技术可以制备单克隆抗体,对实验动物(如小鼠)必须进行________处理,细胞融合时与植物原生质体融合相比,特有的诱导融合方法是____ .
(3)有人提出,可以直接通过基因工程导 入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如下图所示。
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请回答:
①酶A是指________,酶B是指______
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行检测目的基因的方法是_______;Ⅲ指代的细胞具有的特点是________.
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(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用文字描述该过程。
近年来,我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA。G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原,它们刺激人体可诱导产生相应抗体和细胞免疫。人被带毒动物咬伤后,一旦感染,若不及时采取有效防治措施,可导致严重的中枢神经系统急性传染病,病死率高。人被咬伤后,病毒从伤口进入,先停留在伤口周围的神经背根神经节内,然后沿着传入神经传到脊髓,再上行到脑内,并在其中大量繁殖。机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术主要是________________________。
(2)下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:![]()
①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是__________细胞,该细胞能够产生_______。从小鼠内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是_________ 。
②图中B过程是细胞融合,相比植物细胞融合过程,其特有的诱导方式是用_________处理。融合后的细胞有三种情况,需要用特定的____________进行筛选。
③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有__________ 等优点。
(3)单克隆抗体技术还有哪些用途? ______________________________
近年来,我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA。G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原,它们刺激人体可诱导产生相应抗体和细胞免疫。人被带毒动物咬伤后,一旦感染,若不及时采取有效防治措施,可导致严重的中枢神经系统急性传染病,病死率高。人被咬伤后,病毒从伤口进入,先停留在伤口周围的神经背根神经节内,然后沿着传入神经传到脊髓,再上行到脑内,并在其中大量繁殖。机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术主要是________________________。
(2)下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:
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①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是__________细胞,该细胞能够产生_______。从小鼠内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是_________ 。
②图中B过程是细胞融合,相比植物细胞融合过程,其特有的诱导方式是用_________处理。融合后的细胞有三种情况,需要用特定的____________进行筛选。
③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有__________ 等优点。
(3)单克隆抗体技术还有哪些用途? ______________________________
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