摘要:3.DNA半保留复制实验 1958年Meselson和Stahl利用氮标记技术在大肠杆菌中首次证实了DNA的半保留复制.他们将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4Cl培养基中繁殖了15代.使所有的大肠杆菌DNA被15N所标记.可以得到15N标记的DNA.然后将细菌转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养.在培养不同代数时.收集细菌.裂解细胞.用氯化铯密度梯度离心法观察DNA所处的位置.由于15N-DNA的密度比普通DNA的密度大.在氯化铯密度梯度离心时.两种密度不同的DNA分布在不同的区带. 实验结果表明:在全部由15N标记的培养基中得到的15N-DNA显示为一条重密度带位于离心管的管底.当转入14N标记的培养基中繁殖后第一代.得到了一条中密度带.这是15N-DNA和14N-DNA的杂交分子.第二代有中密度带及低密度带两个区带.这表明它们分别为15N14N-DNA和14N14N-DNA.随着以后在14N培养基中培养代数的增加.低密度带增强.而中密度带逐渐减弱.离心结束后.从管底到管口.CsCl溶液密度分布从高到低形成密度梯度.不同重量的DNA分子就停留在与其相当的CsCl密度处.在紫外光下可以看到DNA分子形成的区带.

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