34．某一质粒载体具有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因(见图13)，在氨苄青霉素抗性基因内有一限制性核酸内切酶Bgl I的切点。现用Bgl I切割该载体进行基因克隆。下列哪种菌落是含重组质粒的受体细胞克隆　　（　　　）

A．菌落①　B．菌落②　C．菌落③　D．菌落④

现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用Kpnl单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子。用EcoRI、Kpnl同时酶切后到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是                                                                        （    ）

第三代疫苗——DNA疫苗是指将编码抗原蛋白的基因插入到适宜的质粒中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。下列有关DNA疫苗的叙述，正确的是（    ）

现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Ⅰ酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Ⅰ单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用Ⅰ、Ⅰ同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是

3．(2012·江苏，32)图①表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图②表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MpsⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG。请回答下列问题：

(1)图①的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由________________________连接。

(2)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图①中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________________________。

(3)若图①中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图①及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。

(4)若将图②中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。