(9分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：

图1　转基因操作流程图

表2　几种限制酶识别序列及切割位点表

(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法，通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的，如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列，这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。

(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质，若目的基因扩增4代，则共用了引物Ⅰ________个。

(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程：__________________________。

(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是____________________。

(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。

(6) 假设该抗盐碱基因D，通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上，则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

(4分)眼虫(一种原生动物)细胞中含有叶绿体，该事实说明叶绿体可以在某些动物细胞中存活。某学习小组针对眼虫的这一特性，提出一个探究课题：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交。并设计如下实验方案。
实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。
实验步骤：

请回答：
(1)步骤①所选择的植物材料细胞中，必须有的细胞器是         。
(2)步骤③过程所用的酶是              。
(3)步骤④除了用电激之外，还可以用                   等做诱导因素。
(4)如果让动植物杂交种批量培养生产，可以用              技术。

眼虫（原生动物）细胞中含有叶绿体，该事实说明叶绿体可以在某些动物细胞中存活，某学习小组针对眼虫的这一特性，提出一个探究课题：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交，并设计如下实验方案。实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。以下说法正确的有

    第一项：步骤①所选择的植物材料细胞中，必须有的细胞器是叶绿体

第二项：步骤③过程所用的酶是纤维素酶和果胶酶

第三项：步骤④除了用电激之外，还可以用病毒、聚乙二酵等作诱导融合因素

    第四项：如果让动植物杂交种批量培养生产，可以用动物细胞培养技术

    A. 有一项                   B. 有二项                    C. 有三项                    D. 全正确

(9分)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：

图1　转基因操作流程图

表2　几种限制酶识别序列及切割位点表
(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法，通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的，如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列，这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。
(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质，若目的基因扩增4代，则共用了引物Ⅰ________个。
(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程：__________________________。
(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是____________________。
(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。
(6) 假设该抗盐碱基因D，通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上，则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

(4分)眼虫(一种原生动物)细胞中含有叶绿体，该事实说明叶绿体可以在某些动物细胞中存活。某学习小组针对眼虫的这一特性，提出一个探究课题：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交。并设计如下实验方案。

实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。

实验步骤：

请回答：

(1)步骤①所选择的植物材料细胞中，必须有的细胞器是          。

(2)步骤③过程所用的酶是               。

(3)步骤④除了用电激之外，还可以用                    等做诱导因素。

(4)如果让动植物杂交种批量培养生产，可以用               技术。