摘要:34. “基因靶向 技术.指的是应用DNA同源重组原理.通过一定的载体.用设计好的目的基因替代靶基因.从而达到使靶基因功能丧失的目的.借助这一技术.科学家可以用小鼠进行实验.使其体内的某项特定基因丧失功能.以帮助人们找到治疗疾病的有效方法.下面是该实验的基本过程.请回答有关问题. (1)获得胚胎干细胞.实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞.这是因为ES细胞具有发育的 . (2)获取目的基因. ①目的基因是靶基因的同源片段.经过修饰使靶基因的功能改变或丧失.就可获得目的基因.如果要获得活性降低了的x酶蛋白的目的基因.可以采用蛋白质工程技术.请简述其过程. ②为了提高实验成功率.需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝.与体内DNA复制相比.PCR反应体系需加入哪两种特别的物质? . . (3)将基因表达载体导入ES细胞.从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞.然后培育出小鼠. ①由ES细胞培育出小鼠的过程中.需要采用哪些技术手段? ②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品.可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组.请简述这种检测方法.

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“基因靶向”技术,指的是应用DNA同源重组原理,通过一定的载体,用设计好的目的基因替代靶基因,从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术,科学家可以用小鼠进行实验,使其体内的某项特定基因丧失功能,以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程,请回答有关问题:
(1)获取目的基因。
①经过修饰使靶基因的功能改变或丧失就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因,可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造,这一技术叫做___________。
②为了提高实验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝。
(2)构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成,除了目的基因以外,还必须有________基因,以便于细胞的筛选。质粒具有的一至多个__________位点,使目的基因插入其中成为可能,因此常被选作运载体。
(3)将基因表达载体导入ES细胞,并从中筛选,然后培育出小鼠。
①由ES细胞培育出小鼠的过程中,主要应用了________技术和________技术。
②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组,可通过观察小鼠的性状来检测,这属于________水平的鉴定。
③获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞,这是因为ES细胞具有_________。请举出一例获取ES细胞的常用方法:_____________。
(4)上述基因工程过程中,属于核心步骤的是____________。
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“基因靶向”技术,指的是应用DNA同源重组原理,通过一定的载体,用设计好的目的基因替代靶基因,从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术,科学家可以用小鼠进行实验,使其体内的某项特定基因丧失功能,以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程,请回答有关问题:

(1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞,这是因为ES细胞具有发育的________。请举出一例获取ES细胞的常用方法: ____________________________________。

(2)获取目的基因。

①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失,就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因,可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造,这一技术叫做________。

②为了提高实验成功率,需要通过________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝。

(3)构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成,除了目的——基因以外,还必须有________基因,以便于细胞的筛选。质粒具有的一至多个________位点,使目的基因插人其中成为可能,因此常被选作运载体。

(4)____________________,并从中筛选,然后培育出小鼠。

①由ES细胞培育出小鼠的过程中,需要采用________技术和________技术。

②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组,可通过观察小鼠的性状来检测,这属于________水平的鉴定。

 

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9.(1 6分)“基因靶向”技术,指的是应用DNA同源重组原理,通过一定的载体,用设计 好的目的基因替代靶基因,从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术,科学家可以用小鼠进行实验,使其体内的某种特定基因丧失功能,以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程,请回答有关问题:

    (1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。 ES细胞是由___________中分离出来的一类细胞。

实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞,这是因为ES细胞具有发育的_________

_______________________________________________________________________。

    (2)获取目的基因:

    ①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失,就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因,可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造,:这一技术叫做__________________工程。

    ②为了提高实验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.PCR技术需要的材料与条件有___________________________________。

    (3)构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成,除了目的基因以外,还必须有__________基因,以便于细胞的筛选。质粒具有的一个或多个限制酶的切割位点,使目的基因插入其中成为可能,因此常被选作运载体。

(4.)将基因表达载体(目的基因)____________,并从中筛选,然后培育出小鼠。

   ①由ES细胞培育出小鼠的过程中,需要采用____________________________技术。

   ②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组,可通过观察小鼠的性状来检测,这属于_________________________水平的鉴定。

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9.(1 6分)“基因靶向”技术,指的是应用DNA同源重组原理,通过一定的载体,用设计 好的目的基因替代靶基因,从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术,科学家可以用小鼠进行实验,使其体内的某种特定基因丧失功能,以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程,请回答有关问题:

    (1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。 ES细胞是由___________中分离出来的一类细胞。

实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞,这是因为ES细胞具有发育的_________

_______________________________________________________________________。

    (2)获取目的基因:

    ①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失,就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因,可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造,:这一技术叫做__________________工程。

    ②为了提高实验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.PCR技术需要的材料与条件有___________________________________。

    (3)构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成,除了目的基因以外,还必须有__________基因,以便于细胞的筛选。质粒具有的一个或多个限制酶的切割位点,使目的基因插入其中成为可能,因此常被选作运载体。

(4.)将基因表达载体(目的基因)____________,并从中筛选,然后培育出小鼠。

   ①由ES细胞培育出小鼠的过程中,需要采用____________________________技术。

   ②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组,可通过观察小鼠的性状来检测,这属于_________________________水平的鉴定。

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