摘要：1．凝胶色谱法分离蛋白质的原理 凝胶色谱法也称为分配色谱法.它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一.所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体.这些小球体大多数是由多糖类化合物构成.小球体内部有许多贯穿的通道.当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时.各分子在色谱柱内进行两种不同的运动.即垂直向下的运动和无规则的扩散运动.相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部.只能分布在颗粒之间.通过的路程较短.移动速度较快,相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道.通过的路程较长.移动速度较慢.因此.样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出.相对分子质量中等的分子后流出.相对分子质量最小的分子最后流出.这种现象又叫分子筛现象.此外.凝胶本身具有三维网状结构.相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空袭时阻力大.而相对分子质量小的分子通过时阻力小.因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分离.
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在对蛋白质的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图是利用凝胶色谱法分离血红蛋白的示意图，请回答与血红蛋白的提取和分离的有关问题：
(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，分别是：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、________________、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过________去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过____________法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经__________________进行纯度鉴定。
(2)上图显示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离时，试管中收集到的液体最先出现的是__________________，原因是___________________________________。
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