摘要:温度:一般而言.温度越高化学反应越快.但酶是蛋白质.若温度过高会发生变性而失去活性.因而酶促反应一般是随着温度升高反应加快.直至某一温度活性达到最大.超过这一最适温度.由于酶的变性.反应速度会迅速降低.大多数酶.在30-40℃范围内显示最高活性.低温不会使酶失去活性.但使酶活性降低,高温可导致酶失去活性.

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现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,并完成下列有关问题。

实验原理:

①有毒物质会使动物细胞发生染色体变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)可判断该化学物质的毒性。

②有毒物质也可以让动物细胞发生癌变,根据癌变细胞的数量也可以判断该化学物质毒性。

材料用具:略

实验步骤:

(1)制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入____________处理,使胚胎组织分散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。

(2)进行细胞培养。

①取A、B、C三个洁净的培养瓶,分别加入等量的细胞悬浮液;

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;

③把三个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养一段时间,此时悬浮液中分散的细胞都贴附在瓶壁上,这种现象称为________,当这些细胞的表面相互接触后就会发生__________________________________现象,细胞将停止生长。

(3)检验。

方法1:

①同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用__________将细胞从瓶壁上洗脱下来,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。

②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加1~2滴龙胆紫溶液进行染色,3~5 min后,盖上盖玻片。

③把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于__________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值),判断这两种化学物质的毒性。

方法2:

将贴附在瓶壁上的细胞用方法1中用到的药剂处理后,继续分瓶培养,这种培养过程称为________。一般而言,这种培养传至______代后就不易传下去了。若细胞传至________代以后,仍不死亡,则说明这些细胞可能发生癌变。比较三个培养瓶中的癌变细胞的数量,判断这两种化学物质的毒性。

 

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