（广东A卷）（10分）生物技术实践

（1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生                 ，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间       表示。

（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图

Ⅰ中的主要成分为       ；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：       。反应过程中打开模板DNA双链的方法是       。

（15分）生物选做题
A．[生物技术实践] 啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。在啤酒生产过程中，发酵是重要环节。生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多。当糖度下降到一定程度后，结束发酵。最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程，回答以下问题：
（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意      和      ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：根据                          筛选出突变菌。
（2）酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是                    。
（3）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH值，判断取样先后顺序的主要依据是                                              。
（4）小麦脱粒以后还有大量的麦秆，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是                     。请提出解决该问题的方法。（列举两种方法）
                                                                       
（5）突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是                                    ，加入DNA聚合酶的作用是                                            。
B．[现代生物科技专题] 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是               。
（2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用            酶和         酶。常用的运载体有            等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有             以便进行筛选。进行基因转移时，通常要将外源基因转入        中，原因是                。
（3）通常采用      __________   技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的          细胞中特异性表达。
（5）为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的        转入        细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为          。

(生物技术实践)PCR是一种体外快速扩增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个。PCR需要模板DNA、引物、脱氧核苷酸和DNA聚合酶等条件。下图为模板DNA分子及2种引物，请回答相关问题。

(1)PCR的全称是________。RCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境的不同，在PCR技术中先用95 ℃高温处理的目的是________，而这一过程在细胞内是通过________实现的。

(2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________。请在图中绘出引物结合的位置。

(3)若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入________个引物。

(4)DNA子链复制的方向是________，这是由于________________________。

[生物———选修I生物技术实践]

以下是制作果醋和果酒的流程示意图，回答下列有关问题：

（1）图1中方框内所示流程为________________，通常在______________℃进行。

（2）冲洗的主要目的是                ，冲洗时应特别注意不能                ，以防止菌种的流失。

（3）某同学设计了图2所示的装置。充气口的主要作用是在醋酸发酵阶段___________；排气口排出的主要是由              产生的______；排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接是为了                               ；出料口的作用是              。

（4）在酒精发酵阶段主要发生的化学反应是_____________________（总反应式）。果酒所呈现出的颜色，来自               ，果酒中是否有酒精，可以用          检验。

（5）在用玻璃瓶进行酒精发酵生产时，必须对玻璃瓶用                     进行消毒，然后再加入葡萄汁，加入的葡萄汁不应超过玻璃瓶体积的             。

[生物——选修1生物技术实践]（15分）
下面是果酒和果醋制作的实验流程和发酵装置。根据图示回答下列问题：

（1）果酒和果醋的制作分别利用了酵母菌和       两种微生物的发酵原理。后者在结构上的主要特点是                                   。
（2）图2装置中的充气口在        过程中要关闭。否则发酵液就可能变酸，请写出其反应式         ；而排气口在该过程中应开放，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是               。
（3）影响上述微生物发酵的主要因素有           （两项即可），果汁发酵后，是事有酒精产生，可以用            来检验，在酸性条件下呈现      色证明有酒精产生。
（4）在制葡萄酒的过程中，在不同时间内对发酵液样品进行检测，发现发酵液的pH一直下降，原因是                                  。