下图是利用质粒（有抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三种限制酶切割位点）获得转基因抗盐烟草的培育过程，请据图回答有关问题：

（1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是           。从基因文库中获得的抗盐基因可用          技术进行扩增。

（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能               ，也不能合成抗盐基因的mRNA。

（3）为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的             作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

（4）图中将抗盐基因导入质粒，需用             限制酶对质粒和                 进行切割。

（5）烟草组织细胞具有                 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗盐基因的烟草组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的              、                    。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是                 。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。
原因是                                                    。
（2）过程②称为                   。
（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。
（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）
②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。
（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。

原因是                                                    。

（2）过程②称为                   。

（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。

（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）

②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。

（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？　　 。原因是　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（2）过程②称为　　　　　　　　　 。

（3）为使过程⑧更易进行，可用　　　 处理D。为了检测大肠杆菌是否产生了人胰岛素，可采用的方法是　　　　　　　　　 。

（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将用EcoRI切割后的目的基因与质粒用DNA连接酶进行连接，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有　　 种。

②将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是 。

③在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是　　　　　　　　 。

（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是　　　　　　 。除酶外还需要加入引物，其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（6）如果用该技术将一个位于DNA一端的目的基因进行扩增，那么连续扩增4次后，只含目的基因的DNA占全部DNA的比例是　　 　　 。

40．【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）

下图是利用质粒（有抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三种限制酶切割位点）获得转基因抗盐烟草的培育过程，请据图回答有关问题：

（1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是           。从基因文库中获得的抗盐基因可用          技术进行扩增。

（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能               ，也不能合成抗盐基因的mRNA。

（3）为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的             作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

（4）图中将抗盐基因导入质粒，需用             限制酶对质粒和                 进行切割。

（5）烟草组织细胞具有                 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗盐基因的烟草组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的              、                    。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是                 。