摘要:39.[生物--选1生物技术实践] 人和哺乳动物的尿中含有尿素.大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶.可通过降解尿素作为其生长的氮源.现对土壤中的这类细菌进行分离实验.请回答下列问题: (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作.包括培养基和各种器皿都必须是无菌的.常用的灭菌方法有 . (2)将样液进行一系列的梯度稀释.然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 旁进行操作.接种后的培养皿 于37℃的 中培养. (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌.从功能上划分该培养基属于 培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌.其菌落周围会出现红色环带.这是由于尿素被分解产生的 使pH升高.酚红指示剂产生的颜色变化.从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大.表明该菌株利用尿素的能力 . (4)与全营养培养基中的菌落相比.以尿素为氮源的培养基中菌落数 . A.多 B.少 C.相等 D.几乎为零

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(09广东卷)第38题(生物技术实践)和39题(现代生物科技专题)是选做题,考生只需作答其中一题。请根据下述材料,回答第38题或39题。

   材料:饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪、禽等动物由于缺乏有关酶,无法有效利用植酸,造成磷源浪费,而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成为目前重要的饲料添加剂之一。

(10分)生物技术实践

(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生                 ,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间       表示。

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:

 

 

 

 

 

Ⅰ中的主要成分为       ;Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

(3)为建设基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:       。反应过程中打开模板DNA双链的方法是       。

(4)除植酸酶外,微生物还应用在                  的生产中。

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(15分)生物选做题
A.[生物技术实践] 啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。在啤酒生产过程中,发酵是重要环节。生产过程大致如下:将经过灭菌的麦芽汁充氧,接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐。初期,酵母菌迅速繁殖,糖度下降,酒精浓度渐渐上升,泡沫不断增多。当糖度下降到一定程度后,结束发酵。最后分别输出有形物质和啤酒。根据上述过程,回答以下问题:
(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2:制备选择培养基。在基本培养基的基础上,注意      和      ,加琼脂后灭菌,制成固体平板。
步骤3:将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4:根据                          筛选出突变菌。
(2)酿酒过程中,经检测活菌数量适宜但却不产生酒精,应采取的措施是                    。
(3)为研究发酵罐中酵母菌的生长状况,常要取样统计分析,并测定pH值,判断取样先后顺序的主要依据是                                              。
(4)小麦脱粒以后还有大量的麦秆,主要成分为木质素、纤维素和半纤维素,但是酵母菌无法直接利用,原因是                     。请提出解决该问题的方法。(列举两种方法)
                                                                       
(5)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中,PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物的作用是                                    ,加入DNA聚合酶的作用是                                            。
B.[现代生物科技专题] 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答:
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是               。
(2)在基因工程中,将目的基因与运载体结合时必须用            酶和         酶。常用的运载体有            等,而作为运载体必须具备相应的条件,例如应具有             以便进行筛选。进行基因转移时,通常要将外源基因转入        中,原因是                。
(3)通常采用      __________   技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的          细胞中特异性表达。
(5)为使外源基因在后代中长期保持,可将转基因小鼠体细胞的        转入        细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为          。

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