37.(现代生物科技专题,l5分)

   2007年诺贝尔生理学或医学奖授予在“基因靶向”技术方面作出突出贡献的三位科学家。“基因靶向”技术,指的是应用DNA同源重组原理,通过一定的载体,用设计好的目的基因替代靶基因,从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术,科学家可以用小鼠进行实验,使其体内的某项特定基因丧失功能,以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程,请回答有关问题。

   (1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞(或受精卵)作为目的基因的受体细胞,这是因为______________。举出一例获取Es细胞的常用方法:______________。

   (2)获取目的基因。

①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失,就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的x酶蛋白的目的基因,可以采用蛋白质工程技术,请简述其过程。                      

   ②为了提高实验成功率,需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比,PCR反应体系需加入哪两种特别的物质?

                                    

  (3)将基因表达载体导入ES细胞,从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞,然后培育出小鼠。

   ①由ES细胞培育出小鼠的过程中,需要采用哪些技术手段?

                                    

②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品,可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组。请简述这种检测方法。

                                 

 0  124161  124169  124175  124179  124185  124187  124191  124197  124199  124205  124211  124215  124217  124221  124227  124229  124235  124239  124241  124245  124247  124251  124253  124255  124256  124257  124259  124260  124261  124263  124265  124269  124271  124275  124277  124281  124287  124289  124295  124299  124301  124305  124311  124317  124319  124325  124329  124331  124337  124341  124347  124355  447348 

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