14分）、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于______                          。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制，也不能______                    。

(3)在构建重组质粒时,应选用______       和_____        _两种酶对______           和_____               _进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______       、_____             _。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______       菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______           作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从        水平鉴定烟草植株的耐盐性。

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______          技术，愈伤组织经______               进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                      。

40.  ［生物——选修3:现代生物科技专题］(15分）

某质粒上有SalI、Hi_ndm、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨 苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来 源属于______。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐 基因在烟草细胞中不能______，也不能______。

(3)在构建重组质粒时,应选用______和______两种隳对______和______进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

(4)  基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图 表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检 测基因表达载体是否导入了农杆菌。

培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______、______。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______作探针进行分子杂交检测，又要用______方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要 用_______技术，愈伤组织经______进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                         。

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过                     获取PG基因。
（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的     处，
DNA连接酶作用于      处。（填“a”或“b”）

（3）若构建重组DNA分子所用的限制性内切酶的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

（4） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和           法。
（5）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用               技术。
（6）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的          作探针进行分子杂交检测导入是否成功，又要用          方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
（7）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是_______________、_____________、____________、_____________。[来源:学科网ZXXK]
(8)科学家成功地把耐盐基因嫁接到水稻的DNA分子上，其物质基础是　　　　    　

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过                      获取PG基因。

（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的      处，

DNA连接酶作用于       处。（填“a”或“b”）

（3）若构建重组DNA分子所用的限制性内切酶的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

（4） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和            法。

（5）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用                技术。

（6）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的           作探针进行分子杂交检测导入是否成功，又要用           方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

 （7）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是_______________、_____________、____________、_____________。[来源:ZXXK]

  (8)科学家成功地把耐盐基因嫁接到水稻的DNA分子上，其物质基础是　　　　     　

(I)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答

(1) 检测尿糖可以使用的试剂是                 。该图提取目的基因的方法
为           法，B的化学本质是           ，从B到C需要的酶有            。D细胞一般选用大肠杆菌等微生物，为使过程⑧更易进行，可用            处理D的细胞。
(2)用某人的胰岛素基因制成的单链DNA探针，检测下列物质，能形成杂交分子的是
①该人胰岛A细胞中的DNA（经处理成单链） ②该人胰岛B细胞的mRNA
③该人胰岛A细胞的mRNA       ④该人肝细胞中的DNA（经处理成单链）