研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答

1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                          ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为        。

2.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                。

3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是              ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是    ，这 两种酶作用的化学键都是          。

4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用　　 　　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

6.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　                               　    　。

7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组，并将重组质粒导入原本无amp^R和tet^R  的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌，现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___       _____ ，图三结果显示，多数大肠杆菌内导入的是___            __。

回答下列有关细胞分裂的问题。（11分）

用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸培养某种细胞一段时间后，再移至普通培养基中培养，不同间隔时间取样，进行放射显影，在显微镜下观察计数，统计标记细胞的百分数。甲图中A：细胞核开始被标记；B：一个被标记的细胞X开始进入分裂期；C：细胞X着丝点开始分裂；D：细胞X分裂成两个子细胞，被标记的细胞数目在增加；E：标记细胞第二次进入分裂期；F：被标记的细胞的比例在减少；G：被标记的细胞数目在减少。试回答：

（1）该细胞分裂一次平均经历的时间为_______h。图中_______期（用图中字母表示）DNA分子稳定性最低，适于进行诱发突变。

（2）被标记的细胞比例减少的原因是            。

（3）乙图分裂状态位于甲图的（用图中字母表示）        期的前段。

（4）当细胞完成一个细胞周期后，将可能有以下三种变化； ① 继续分裂进入下一个细胞周期；② 暂停分裂，但保留分裂能力；③ 停止分裂，分化成特定功能的细胞。以下几种特殊细胞的分裂属于哪一类型？（填序号）

癌细胞        ；浆细胞        。造成③这种状态的根本原因是            。

（5）若甲图细胞所代表的生物为杂合子Aa，则该生物的一个体细胞中含有2个a的原因最可能是        。

（6）若下图表示雄果蝇进行某种细胞分裂时，处于四个不同阶段细胞（Ⅰ～Ⅳ）中遗传物质或其载体（①～③）的数量。下列表述中，正确的是

A．Ⅱ代表初级精母细胞

B．在Ⅳ阶段的细胞内，可能发生基因重组

C．能发生Ⅰ→Ⅱ或Ⅲ→Ⅳ的变化，其间易发生基因突变

D．在Ⅱ、Ⅳ阶段的细胞内，都可能含有两个Y染色体

（7）下列选项中，细胞分裂间期不进行的活动有_____（多选，2分）。

A．染色体的数目加倍        B． DNA的复制    C．有关蛋白质合成

D．有关RNA的合成      E．着丝粒分裂      F．细胞壁形成

如图1表示某果蝇体细胞染色体组成，图2表示该果蝇所产生的一个异常生殖细胞，依图回答下列问题：

（1）该精原细胞进行正常的减数分裂时，在次级精母细胞（中期）中性染色体组成为           ，一个初级精母细胞X染色体上的两个W基因在           期发生分离。

（2）若一个精原细胞的一条染色体上的B基因在复制时一条脱氧核苷酸链中一个A替换成T，则由该精原细胞产生的精细胞携带该突变基因的概率是________。

（3）图2所示是一个异常精细胞，造成这种异常的原因是在该精细胞形成过程中     。

（4）果蝇中点状染色体(4号染色体)缺失一条也可以存活，而且能够繁殖后代。已知R、r位于常染色体上，分别控制长翅和残翅这相对性状(残翅为隐性性状)，欲判断残翅果蝇基因是否位于4号染色体上。

实验步骤是：

先利用     果蝇与纯合长翅且4号染色体缺失的果蝇交配，统计子代的性状表现。

实验结果预测及结论：

①若子代中出现长翅果蝇和残翅果蝇且比例为          ，则说明残翅基因位于4号染色体上；

②                              ，则说明残翅基因不位于4号染色体上。

已知限制性核酸内切酶BglⅡ和BamHⅠ的识别序列和切割位点分别为A↓GATCT，G↓GATCC。下列有关叙述，不正确的是

    A. 这两种酶的识别序列都为6个脱氧核苷酸对   

    B. 用这两种酶切割质粒和含目的基因的DNA分子所产生的黏性末端可形成重组DNA分子

    C. 用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamH Ⅰ切割的质粒重组后，仍可以被这两种酶切开

    D. 在基因工程中，若用酶BglⅡ切割某质粒，则该质粒上有且只有一个该酶的切点