摘要:13.(1)限制酶和DNA连接酶 (2)目的基因的检测与表达 (3)“工程菌 能合成生长激素 () 来源: 版权所有:() 版权所有:() 版权所有:()
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基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是
- A.经常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
- B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
- C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
- D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构如图一所示。
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(1)建构基因表达载体时,必须有 、复制原点、目的基因、终止子以及 。
(2)构建人工质粒时要有抗性基因,以便于 。
(3)pBR322分子中有单个EcoRI限制酶作用位点,EcoRl只能识别序列—GAATTC一,并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRl的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端 。
(4)pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点,现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因,通过DNA连接酶作用恢复 ,成功获得了重组质粒。说明 。
(5)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落;再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是 。图三结果显示,多数大肠杆菌导入的是 。
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| A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒 |
| B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 |
| C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 |
| D.导人大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达 |