摘要:( 1 )受反应液中酶浓度的抑制 ( 2 )酶反应的最适温度 ( 3 ) pH 升高.酶活性下降 ( 4 )速度加快 不反应 ( 5 ) C

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(10分)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法,请分析回答下列问题:

(1) 从肝细胞中分离总RNA,经_________获得cDNA,之后经过_________扩增内皮抑素基因。

(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒(如图14所示)都用EcoR I和BamH I进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接,还减少了________的连接,提高了重组质粒的比例。

(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。

选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落,原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌,其突出的优点是:___________________________________

(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并,______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

 

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(10分)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法,请分析回答下列问题:

(1) 从肝细胞中分离总RNA,经_________获得cDNA,之后经过_________扩增内皮抑素基因。
(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒(如图14所示)都用EcoRI和BamH I进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接,还减少了________的连接,提高了重组质粒的比例。
(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。
选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落,原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌,其突出的优点是:___________________________________
(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并,______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

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图中纵坐标表示物质通过细胞膜的运输速率。请据图回答:

(1)红细胞吸收O2、K+的方式依次是           、           。(填字母)图b中出现平台区的主要原因是                                                。

(2)若对离体的心肌细胞施用某种毒素,结果Ca2+吸收量明显减少,而K+的吸收量不受影响,其原因是                                                 。

(3)若用呼吸抑制剂处理心肌细胞,则Ca2+、K+的吸收量都受到影响,其原因是       

                                 ,经呼吸抑制剂处理后,供能不足,影响上述物质吸收。

55.(9分)下表是“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验设计相关内容。请回答:

试管编号

加入材料

处理方法

实验现象

1

2mLH2O2液+2滴清水

无气泡

2

2mLH2O2液+2滴清水

90℃水浴加热

少量气泡,带火星的卫生香不复燃

3

2mLH2O2液+2滴质量分数为3.5%FeCl3液

较多气泡, 带火星的卫生香复燃

4

2mLH2O2液+2滴肝脏研磨液

大量气泡,带火星的卫生香猛烈复燃

(1)该实验中,自变量是                 等反应条件,因变量是

               和              。实验组是           (填试管编号)。

(2)比较3号和4号试管,你得出的结论是                                。

(3)某同学按照表中方法做了这个实验,结果试管3和实验4的现象与表中不同甚至刚好相反,他的实验失败的原因可能是①                                   ;

②                                                                   。

(4)下图为在最适温度下反应物浓度对酶促反应速率的影响。

 


①     如果在A到C浓度范围内,将反应温度均升高10℃,请在图上画出变化后的相应曲线,并注明曲线含义。

②     如果在B到C浓度范围内向反应混合物中都加入少量同样的酶,请在图上画出变化后的曲线,并注明曲线含义。

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图中纵坐标表示物质通过细胞膜的运输速率。请据图回答:

(1)红细胞吸收O2、K+的方式依次是           、           。(填字母)图b中出现平台区的主要原因是                                                。

(2)若对离体的心肌细胞施用某种毒素,结果Ca2+吸收量明显减少,而K+的吸收量不受影响,其原因是                                                 。

(3)若用呼吸抑制剂处理心肌细胞,则Ca2+、K+的吸收量都受到影响,其原因是       

                                 ,经呼吸抑制剂处理后,供能不足,影响上述物质吸收。

55.(9分)下表是“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验设计相关内容。请回答:

试管编号

加入材料

处理方法

实验现象

1

2mLH2O2液+2滴清水

无气泡

2

2mLH2O2液+2滴清水

90℃水浴加热

少量气泡,带火星的卫生香不复燃

3

2mLH2O2液+2滴质量分数为3.5%FeCl3液

较多气泡, 带火星的卫生香复燃

4

2mLH2O2液+2滴肝脏研磨液

大量气泡,带火星的卫生香猛烈复燃

(1)该实验中,自变量是                 等反应条件,因变量是

               和              。实验组是           (填试管编号)。

(2)比较3号和4号试管,你得出的结论是                                。

(3)某同学按照表中方法做了这个实验,结果试管3和实验4的现象与表中不同甚至刚好相反,他的实验失败的原因可能是①                                   ;

②                                                                   。

(4)下图为在最适温度下反应物浓度对酶促反应速率的影响。

 


①     如果在A到C浓度范围内,将反应温度均升高10℃,请在图上画出变化后的相应曲线,并注明曲线含义。

②     如果在B到C浓度范围内向反应混合物中都加入少量同样的酶,请在图上画出变化后的曲线,并注明曲线含义。

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