摘要:(一)操作步骤 1.将装有上清液的高速离心管.从装有冰块的烧杯中取出.配平后.以17000rpm离心20分钟.弃上清.留取沉淀物. 2.加入0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙液lml.用吸管吹打成悬液.以17000rpm离心20分钟.将上清吸入另一试管中.留取沉淀物.加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液. 3.取上清液和沉淀物悬液.分别滴一滴于干净载玻片上.各滴一滴0.02%詹纳斯绿B染液盖上盖片染20分钟.

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以下是有关现代生物技术的两个问题,请回答:
Ⅰ(5分):下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:

(1)图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的?   ___,图C中科学家在进行[①]操作时,要用___            ____分别切割运载体和目的基因,运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过___          ____而结合。
(2)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。
(3)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,往往有很多植株不再具有抗虫特性,原因是_________________  ____。
Ⅱ(10分):现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题。
实验原理:_____________________________________    __。(2分)根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养。
①取A、B、C3个洁净的培养瓶,分别放入___________________________________;
②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。
(3)制作临时装片。
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用            
处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加__________________进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于______________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
结果分析与结论:
(1)经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%, QB=12.5%, QC=0.1%,
由此可知该实验的结论是__________________________________________。(2分)⑵在实验中,C培养瓶起______________作用,C瓶的Q值说明____________________。

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以下是有关现代生物技术的两个问题,请回答:

Ⅰ(5分):下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:

(1)图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的?    ___,图C中科学家在进行[①]操作时,要用___             ____分别切割运载体和目的基因,运载体的 黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过___           ____而结合。

(2)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。

(3)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,往往有很多植株不再具有抗虫特性,原因是_________________   ____。

Ⅱ(10分):现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题。

实验原理:_____________________________________     __。(2分)根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。

材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。

实验步骤:

(1)制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。

(2)进行细胞培养。

①取A、B、C3个洁净的培养瓶,分别放入___________________________________;

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;

③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。

(3)制作临时装片。

①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用            

处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;

②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加__________________进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。

(4)镜检和统计。

     把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于______________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。

结果分析与结论:

(1)经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%, QB=12.5%, QC=0.1%,

由此可知该实验的结论是__________________________________________。(2分)⑵在实验中,C培养瓶起______________作用,C瓶的Q值说明____________________。

 

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以下是有关现代生物技术的两个问题,请回答:

Ⅰ:下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:

(1)图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的?    ___,图C中科学家在进行[①]操作时,要用___             ____分别切割运载体和目的基因,运载体的 黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过___           ____而结合。

(2)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。

(3)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,往往有很多植株不再具有抗虫特性,原因是_________________   ____。

Ⅱ:现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题。

实验原理:_____________________________________     __。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。

材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。

实验步骤:

(1)制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。

(2)进行细胞培养。

①取A、B、C3个洁净的培养瓶,分别放入___________________________________;

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;

③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。

(3)制作临时装片。

①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用            

处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;

②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加__________________进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。

(4)镜检和统计。

     把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于______________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。

结果分析与结论:

(1)经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%, QB=12.5%, QC=0.1%,

由此可知该实验的结论是__________________________________________。⑵在实验中,C培养瓶起______________作用,C瓶的Q值说明____________________。

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(6分)某学校的研究性学习小组开展了“探究洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的日周期性”的课题研究,以确定洋葱(染色体数2N=16)根尖取材的最佳时间。细胞分裂指数是衡量洋葱根尖细胞分裂状况的指标之一,分裂指数=(观察视野中分裂期细胞的平均数/总细胞平均数)×100%。实验操作步骤如下:

第一步:取多个已经培养好的洋葱鳞茎(根长约为5 cm左右)作为实验材料。

第二步:在某一天的8~18点时间段内每隔1小时,取3根洋葱根尖分别制成临时装片。  制作临时装片的方法如下:

①解离:剪取洋葱根尖2~3 mm,立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液(体积比为1∶1)的玻璃皿中,在室温下解离3~5min。

②漂洗:将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。

③染色:将根尖放进盛有质量浓度为0.01 g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5 min。

④制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上载玻片,用拇指轻轻按压载玻片。

第三步:观察、计数并记录结果。

请回答下列问题:

(1)请改正制作临时装片步骤中的1处错误。        。

(2)步骤①解离的目的是        。

(3)该研究小组的同学最后把数据转变为下图1,据图得出的结论是        。

(4)图2表示在高倍镜下观察洋葱根尖细胞时的一个视野,图中箭头所指的细胞正处于      期,该细胞不能进入下一分裂时期的原因是        。

(5)请画出洋葱根尖分生区细胞有丝分裂一个周期中染色体数目的变化曲线图。

 

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51.(13分)下图是以洋葱为实验材料的实验现象或结果,请据图回答下列问题:

(1)图1是利用紫色洋葱叶肉细胞进行的质壁分离实验现象,实验时外界溶液是滴入少量红墨水的0.3g/ml的蔗糖溶液,那么图中A、C两处的颜色分别是__________、__________(顺序错不得分)。

有同学用洋葱鳞片叶内表皮细胞进行图1所示实验,为清晰观察到实验现象,需对光学显微镜的光圈进行的操作是__________。

(2)图2是利用洋葱根尖进行的有丝分裂实验现象,细胞D与E的染色体数之比为__________,核DNA数之比为__________;若要观察减数分裂过程,常用植物的__________做切片,实验中装片制作的流程为__________。

(3)图3是分离洋葱绿叶中色素得到的滤纸条,由该结果可知洋葱绿叶中__________。(多选)

A.色素的种类       B.不同色素在层析液中溶解度的相对大小

C.不同色素的相对含量   D.各种色素的颜色

(4)某同学在秋天做色素提取分离实验时,提取和分离过程操作正确,而实验结果只出现了图3中色素带1和2,最可能的原因是__________。

(5)实验表明,植物叶片上气孔的开闭(见图4)与保卫细胞中脱落酸(ABA)的含量密切相关,ABA具有明显促进更多气孔关闭的作用。为验证ABA可导致更多的气孔关闭,请完成实验。

①制片:取菠菜叶,用镊子剥取表皮,在载玻片上滴一滴清水,将表皮展平放入清水中,__________,制成临时装片。

②镜检:将制成的临时装片置于低倍显微下观察并记录。

③处理:接着将上述临时装片盖玻片的一侧滴上_________,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。

④镜检:将步骤③制得的临时装片再置于低倍显微镜下进行观察和记录。

a.预测两次镜检观察结果的不同之处是:第二次镜检时_________________________。

b.低倍镜下找到一个气孔,换高倍镜观察该气孔关闭时保卫细胞的形态结构,如何操作?

若不考虑视野变暗,请写出简要步骤。__________。

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