摘要: SiO2尘粒吸入肺泡后被肺巨噬细胞吞噬.而这种巨噬细胞会由于某中细胞器的破裂而发生自溶,推测这种细胞器最有可能是下面哪一种( ) A.线粒体 B.内质网 C.高尔基体 D.溶酶体

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(8分)我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产人生长激素的示意图。pBR322质粒为基因工程中经常选用的载体,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,该质粒上有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的识别和切割位点,如图(已知普通大肠杆菌中不含有pBR322质粒上任何基因;限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同)。回答问题:

(1)过程②为       ,质粒上的抗性基因作用是        。

(2)为防止④过程中出现多种重组质粒,一般用两种限制酶分别对目的基因和质粒进行剪切,从而把目的基因和质粒各自剪切出       (不同/相同)的黏性末端。基因表达载体中目的基因除包含以上所描述的结构外,还必须含有        。

(3)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ中的任意两种,同时对多个质粒pBR322进行切割,则形成的DNA片段共      种;为提高⑤过程成功率,常用      溶液处理大肠杆菌。

(4)现在用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置,一段时间后,菌落的生长状况如上图所示。甲培养基上能生长的大肠杆菌中含有      基因,与丙相比,乙培养基中少了两个菌落,说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌       。

 

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29、科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ,限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—,据图回答:

(1)过程①所需要的酶是     。

(2)在构建基因表达载体过程中,应用限制性核酸内切酶      切割质粒,用限制性核酸内切酶      切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________     原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是                 。

(3)在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理,以增大     的通透性,使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果(黑点表示菌落),能够生长的细菌中已导入了             ,反之则没有导入;再将灭菌绒布按到培养基a上,使绒布表面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图b的结果(空圈表示与a对照无菌落的位置)。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是                 ,这些细菌中导入了________________。

(5)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为                         。写出目的基因导入细菌中表达的过程                                     。

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