摘要:检测生物组织中糖类.脂肪.蛋白质的其他简易方法 (1)检测生物组织中糖类的其他简易方法 Molisch反应(α- 萘酚反应) 此方法是鉴定糖类最常用的颜色反应.它的原理是:糖类在浓酸作用下所形成的糠醛及其衍生物可以与α- 萘酚作用.形成红紫色复合物.由于在糖溶液与浓硫酸两液面间出现红紫色的环.因此又称紫环反应.α- 萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替.麝香草酚溶液比较稳定.其灵敏度与α- 萘酚一样.除了糖类之外.各种糠醛衍生物.葡萄糖醛酸.丙酮.甲酸.乳酸等都可以呈现近似的阳性反应.因此.阴性反应证明没有糖类物质的存在,而阳性反应只能说明有糖类存在的可能. 蒽酮反应 糖类经浓酸水解.脱水生成的糠醛及其衍生物与蒽酮反应生成蓝绿色复合物. Benedict反应 班氏试剂是斐林试剂的改良(也是含有Cu2+的碱性溶液).能使具有自由醛基或酮基的糖类氧化.其本身则变成砖红色或黄色的Cu2O.可用来测定还原糖的存在.它利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂.其碱性比斐林试剂弱.灵敏度高.干扰因素少.因而在实际应用中有更多的优点. Bial反应 戊糖与浓盐酸加热形成糠醛.在有Fe3+存在的条件下.它与甲基间苯二酚缩合.形成深蓝色的沉淀物.己糖也能发生反应.产生灰绿色甚至棕色的沉淀物. (2)检测生物组织中脂肪的其他简易方法 油点试验 将含有脂肪的混合物磨碎后擦在一片滤纸上.然后朝向光源观看.应该有半透明的油点出现.此油点不能挥发掉.当滤纸浸过苯后.油点消失,或将混合物磨碎后溶于苯液中.然后过滤.取一滤纸放入滤液中.取出后让苯挥发.朝向光源观看.如有半透明油点存在.则证明混合物中含有脂肪. 乳液形成试验 将一含有脂肪的混合物溶液稍微加热.加入少量乙醇.摇匀后静置.脂肪可分散成许多微粒.形成白色乳状液. (3)检测生物组织中蛋白质的其他简易方法 对各种氨基酸特异的某些颜色反应.可用来检测含有这些氨基酸的蛋白质.这些颜色反应包括Millon反应.黄蛋白反应.茚三酮反应以及Hopkins-Cole反应等. Millon反应 米伦试剂为硝酸.亚硝酸.硝酸汞.亚硝酸汞的混合物.能与单酚及双酚和吲哚衍生物产生颜色反应.但不能检验尿蛋白. 茚三酮反应 蛋白质.多肽和各种氨基酸具有茚三酮反应.除无α?氨基的脯氨酸和羟脯氨酸呈黄色外.其他氨基酸生成紫红色.最终为蓝色化合物. 黄蛋白反应 它是芳香族氨基酸.特别是酪氨酸和色氨酸蛋白质所特有的颜色反应. 表8 部分氨基酸的颜色反应 所测定的氨基酸 名称 试剂 颜色 精氨酸 半胱氨酸 半胱氨酸 组氨酸.酪氨酸 色氨酸 色氨酸 酪氨酸 酪氨酸 酪氨酸.色氨酸 苯丙酪氨酸 Sakaguchi反应 硝普盐反应 Sullivan反应 Pauly反应 水合乙醛酸反应 Ehrlich反应 Millon反应 Folin-Ciocalteu反应 黄蛋白反应 α- 萘酚和次氯酸钠 硝普钠溶于稀氨溶液中 萘醌-[1,2]-4-磺酸钠和亚硫酸氢钠 重氮化的对氨基苯磺酸溶于碱性溶液 水合乙醛酸溶于硫酸中 对二甲基氨基苯醛溶于盐酸中 硝酸汞溶于亚硝酸.加热 磷钼钨酸 煮沸的浓硝酸 红 红 红 红 紫 蓝 红 红 黄

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