PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )。

A．反复洗涤 B．用酒精擦洗

C．高压灭菌 D．在－20 ℃储存

(12分)在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(聚合酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图，图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)图中的变性、延伸分别是指________、________。

(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有____个、____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成____个DNA片段。

(3)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

(14分)近十年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________。

(2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，此过程中原料是________，遵循的原则是________。

(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠________来维持。

（2014?三江县二模）关于细菌的叙述，正确的是（ ）

A.不同种类细菌的生长均需要相同的碳源

B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落

C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期

D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选

（2014?凉山州模拟）微生物需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖，下列与此有关的说法正确的是（ ）

A.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的一定是能分解尿素的细菌

B.有的氮源可以作为细菌的能源物质

C.加入酚红试剂的选择培养基，可以筛选能分解尿素的细菌

D.大肠杆菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的

（2013?丰台区二模）下列有关实验的叙述不正确的是（ ）

A.用于筛选杂交瘤细胞的培养基属于鉴别培养基

B.诱导外植体脱分化需要用含有蔗糖的培养基避光培养

C.平板划线法和稀释涂布平板法均可用于分离纯化菌种

D.用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

（2014?松江区二模）为了研究抗生素X对四种不同细菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了如图抗菌实验，下列有关分析正确的是（ ）

A.四天后细菌3的灰雾地带最长，说明抗生素X 对细菌3的抑制效果最差

B.四天后细菌2的灰雾地带最短，说明抗生素X 对细菌2的抑制效果最差

C.用抗生素X对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好

D.可以用抗生素X去治疗由细菌1引起的疾病

（2013?徐州模拟）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解为可以吸收利用的磷酸盐等．如图是从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程，图中①～⑤表示操作过程．下列说法正确的是（ ）

A.通过图中①～④逐渐稀释，目的是获得单个菌落

B.图中培养基从功能讲属于选择培养基

C.高压灭菌锅灭菌的要求是100℃1.05kg/cm2

D.实验结果显示产植酸酶的理想菌株是A菌株

（2013?绵阳三模）如图为从污水处理池中筛选能够高效分解有机污染物A的菌种的实验流程．据图分析下列说法不正确的是（ ）

A.初选过程①中大多数不能利用有机物A的微生物不能形成菌落

B.过程③应选择A物质含量最低的培养瓶中的微生物进一步接种

C.接种过程④的目的是为了分离和纯化能够分解有机物A的菌种

D.过程⑤重复多次的目的是为了提高菌种分解有机物A的能力

（2012?杨浦区一模）下表为某微生物培养基的配方，下列叙述中正确的是（ ）

A.按物理性质该培养基属于液体培养基；按用途属于通用培养基

B.按物理性质该培养基属于固体培养基；按用途属于选择培养基

C.按培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是自养型

D.按培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是异养型