在现代生物工程技术中，研究方案能实现其目的的是(　　)。　（多选）

某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作正确的是(　　)。（多选）

A．利用平板划线法对细菌进行计数

B．用以石油为唯一碳源的培养基筛选

C．采用稀释涂布平板法分离菌种

D．称取和稀释土壤时应在火焰旁

在利用猕猴桃进行“DNA粗提取与鉴定”实验中，相关操作错误的是(　　)。（多选）

A．直接向剪碎的猕猴桃果肉组织中加入蒸馏水并搅拌，以释放核DNA

B．向猕猴桃果肉研磨液中加入适量的蒸馏水，以降低DNA酶活性

C．将猕猴桃果肉研磨液迅速加热到100 ℃，再冷却后过滤，可以获得DNA粗提物

D．向溶有粗提物的NaCl溶液中加入冷却的体积分数为95%的酒精，可以获得较纯净的DNA

酵母菌与人们的日常生活密切相关，它是生物科学研究中的重要生物之一。请根据所学知识，回答下列有关酵母菌的问题：

(1)土壤中富含各种微生物，将其浸出液接种到特定培养基上，可获得较纯的酵母菌，这一过程叫作________。若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_________________。

(2)在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是__ _、_ ___。在酵母菌的培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑____________________________(答出两点)等条件。

(3)果酒的制作离不开酵母菌。在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是________。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，在酵母菌的酒精发酵过程中，一般将温度控制___________。在果酒发酵的基础上如果继续制果醋的话，不仅要适当提高发酵温度还要 。

(4)酵母细胞常采用________法固定化，若想使这些酵母细胞能被反复使用，实验过程中一定要注意____ ____。

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答下列问题:

(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是

_________________ ___________。

(2)取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。

图乙是经过图甲过程A 纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是________(用编号表示)。研究者在图甲过程C 的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是_____________________________。

(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以____ ____ 为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

(4)从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA ，利用PCR 技术大量扩增获得目的基因。若将1个目的基因分子复制10次，则需要在缓冲液中至少加入_____个引物。将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏_______ _ 能力的酿酒酵母作为受体菌。

(5)将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含__________的培养基中进行酒精发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能_______ ______，即说明所需菌株培育成功。

下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：

(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的____________。

(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是___________________________________；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是______ __。

（3）实验过程通常不用玻璃仪器而用塑料仪器目的是 ，得到的DNA可以用 （试剂名称）来检验显 色。

（4）将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是(　　)（2分）

A．P、Q、R B．p、q、r C．P、q、R D．p、Q、r

某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于____ ____。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能___ _____，也不能______ __。

(3)在构建重组质粒时，应选用____ ____和____ ____两种酶对__ ______和__ __ 进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

(4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用____ ____技术，经过____ 和 ____进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加_____ _ 。

(5)为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_____ ___作探针进行分子杂交检测，又要用____ ____的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

红豆杉，又名紫杉， 可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析并回答：

(1)酶X是________酶，其主要作用是 。

(2)物质Y是________，乙组的作用是 。

(3)为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是_______________________________________________________________。

(4)实验结果：若甲组________________，说明紫杉醇有抗肿瘤作用。

(5)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用________技术把离体的红豆杉细胞经过______ __ 培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。

如图是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题。

(1)“试管牛”技术的操作流程是____ ____(用箭头和字母表示)。

(2)写出图中数字标号代表的结构名称：①____ ____；②___ _____；③____ ____。

(3)d操作的名称是________，受体子宫内胚胎发育的过程中细胞不断分裂，其分裂方式为____ __ __ 。

(4)图中用到的激素是____ ____，过程h常用的方法是___ _____。

(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意 。

(6)受体母牛必须和供体牛属于_____ ___。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是___________________________________________________________。

南京古泉生态农场是生态农业的典范。该农场将养猪、养鱼、沼气工程、养鸭、种植农作物、养蘑菇、种桑养蚕、种植果树等多个生产过程有机地结合起来，成为一种高效良性的循环，生态效益达到了良性发展。请就此生态农场的特点，完成下列问题。

(1)该生态农场充分体现了生态工程基本原理中的___ _____、___ _____和____ ____原理。

(2)该系统工程的核心之一是沼气池，沼气池制作如图所示：

①在图中标出箭头，表示生产过程中的物质循环。

②如果将“无机物—农田”这一环节去掉，对生态农业系统有何影响？________________________________________________________________________。

(3)在该生态农场中存在如图所示的物质循环过程，据图分析不符合生态工程原理的叙述是(　　)。

A．物质经过多级利用，实现了良性循环

B．每一级生产环节都获得产品，提高了经济效益

C．由于食物链延长，能量逐级损耗，系统总能量利用率降低

D．由于各级产物都可以利用，减少了废物和污染