在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体．把目的基因重组人Ti质粒上的T－DNA片段中，再将重组的T－DNA插入植物细胞的染色体DNA中。

（1）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种________分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过________方式而粘合。

（2）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T－DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F₁代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的________。

（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是________。

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有________。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________。

（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________作为探针。

（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占________％。

胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，如图是基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：

（1）完成过程②必需的酶是________酶。

（2）与人体细胞胰岛素基因相比，通过②过程直接获得的DNA片段不含有________。

（3）取自大肠杆菌的物质B，在基因工程中起________作用。

（4）过程⑥⑥所用的酶是________。

（5）为使过程⑧更易进行，可用________处理受体细胞D的细胞壁，以增大其通透性。

1979年，科学家将鼠体内的能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中发现了胰岛素。如下图所示，请据图回答：

（1）图中［2］、［5］、［3］、［7］表示通过________________的途径，获得________的过程。

（2）图中［3］代表________，在它的作用下将________和________切成________末端。

（3）经［9］________的作用将［7］、［6］“缝合”形成［8］________DNA分子。［8］往往含有________基因，以便将来检测。

（4）图中［10］表示将________________的过程，为使此过程顺利进行，一般须将［11］用________处理，以增大［11］细胞壁的________。

（5）［11］表示［8］随大肠杆菌的繁殖而进行________。

（6）如在大肠杆菌细胞内发现了胰岛素，说明________________。

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。

（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。

（2）图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得

________种重组质粒；如果换用Bst l与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。

（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________。

（4）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中________对T－DNA的降解。

（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________________。

（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。

下图表示人类镰刀型细胞贫血症的病因。据图回答：

（1）①过程是________，发生的场所是________；②过程是________，发生的场所是________。

（2）④表示的碱基序列是________，这是决定一个缬氨基的一个________，转运谷氨酸的转运RNA一端的三个碱基是________。

（3）父母均正常，生了一个镰刀型细胞贫血症的女儿，可见此遗传病是________遗传病，若Hb^s代表致病基因，Hb^A代表正常的等位基因，则患病女儿的基因型为________，母亲的基因型为________。　

HGPRT缺陷症的致病基因在X染色体上，患儿发病时有自残行为。下图是－个该缺陷症的系谱图。请分析回答：

（1）此病的致病基因为________性基因，理由是________________。

（2）Ⅲ₃的致病基因来自I世代中的________。

（3）如果Ⅲ₃同时患有白化病，在Ⅲ₃形成配子时，白化病基因与该缺陷症基因之间遵循哪一遗传规律？________________

（4）如果Ⅲ₁与一正常男子婚配，所生子女中患该缺陷症的几率为________。

（5）如果Ⅲ₃与一正常女子（来自世代无此病的家族）婚配，从优生的角度考虑，应选育何种性别的后代？________________

简要说明理由：________________________

根据下图回答下列问题：

（1）A～E结构的名称分别是：

A________　B________　C________　D________　E________

（2）上图表示蛋白质合成中的________过程，是在________内进行的。

（3）由图中的mRNA链可知DNA分子中模板链上对应的碱基序列为________。

（4）该图表明图中所合成的蛋白质的氨基酸排列顺序是由mRNA上的________排列顺序决定的，而mRNA上的这种顺序是由基因的________排列顺序决定的。

CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA（总DNA）的技术。CTAB能跟核酸形成复合物，在高盐溶液（＞0.7 mol／L的NaCl溶液）中可溶并且稳定存在，当降低溶液中盐的浓度（＜0.3 mol／L的NaCl溶液），CTAB－核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀，再用70％酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下：

①在50 ml离心管中加入20 ml　CTAB抽提缓冲液（主要成分是1.4 mol／L的NaCl、2％的CTAB），于65℃水浴中预热；

②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离心管中，于65℃水浴中保温30 min；

③取出离心管中，冷却至室温，加入20 mL的氯仿，轻轻混匀20 min；

④在室温下以12000 r／min的转速离心10－20 min；

⑤将上清液移入另一个离心管中，加入2／3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB－核酸的复合物沉淀；

⑥将沉淀移入另一个离心管中，加入70％乙醇洗涤，重复洗涤1－2次；

⑦吹干乙醇后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8％的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。

请回答下列问题：

（1）植物基因组DNA（总DNA）的提取通常采用机械研磨的方法，常温下研磨时，

植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻，材料在研磨时易于破碎，同时还具有________________的作用。

（2）实验步骤③、④的目的是________________。

（3）实验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是________________。

（4）对DNA进行定性检测常用的试剂是________。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及________、________，使带电分子产生________而实现分离。DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，利用核酸紫外检测仪可以进行________。

固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂（使酶相互连接），海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果（注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量），分析回答：

（1）从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是________________。

（2）乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是________________。

（3）固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丁图可知，固定化酯酶一般可重复使用________次，酶活力明显下降。

（4）固定小麦酯酶不采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为___________。