Ⅰ.某正常夫妻生下的一个血友病男孩,不幸在一次意外中大量失血死亡。该夫妻想借助试管婴儿技术再生一个健康孩子。请结合你所学的知识帮他们解决有关问题:

(1)人类精子是在                 (器官)内形成的,从             期开始,直到生殖机能减退,而女性卵泡的形成和在卵巢内的储备,是在                 (时期)完成的,这是精子和卵子发生上的重要区别。

(2)在体外受精时,精子首先要进行               处理,精子与卵子在体外受精后,应移入发育培养液中继续培养,以便检查                                

(3)人的体外受精胚胎,在8-16个细胞阶段可以移植,而牛羊一般要培养到          

                   阶段才能移植。

(4)你建议这对夫妇选择         性胎儿,这需要在胚胎移植前取1-2个细胞观察    

           或做DNA分析来做性别鉴定。

Ⅱ.提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理和化学方法分离具有不同理化性质的生物大分子。在DNA粗提取实验中,利用DNA不溶于           而蛋白质可以溶,从而将蛋白质和DNA分开;在以鸡血为实验材料时,在鸡血溶液中加入一定量          搅拌后滤取滤液即可;若以洋葱为材料,切碎后加入一定量的               进行充分地搅拌和研磨,再从滤液中获取DNA。

 

Ⅰ.(1)在植物组织培养过程中,由于细胞一直处于                状态,因而容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而产生突变,突变体经过进而发育成为新品种。

(2)突变体产生的原理是                  ,由于具有              的特点,所以需要进行         

(3)如果要用突变体生产药物或食品添加剂,要培养至           阶段,若要生产人工种子,则需要培养至          阶段。

Ⅱ.家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。

 

现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质,利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱:请完成下列实验报告。

I.实验材料:小白鼠胚胎。   

Ⅱ.药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

Ⅲ.实验原理:                                                           ,根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。

Ⅳ.实验步骤:

(1)制备细胞悬液:把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加人胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬液。

(2)进行细胞培养:

①取A、B、C三个洁净的培养瓶,                                          

                                                                       。   

                                                                       

(3)制作临时装片:

①当细胞繁殖到大约第8代左右时,同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞,将细胞固定在不同的分裂时期。

②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央,加1—2滴一定浓度的           染色,3—5 min后,盖上盖玻片,制成临时装片。

(4)镜检和统计:把临时装片放在显微镜下,寻找处于有丝分裂中期的细胞,并与                   对比以确认发生上述变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数(Q值)。

V.实验结果:

培养瓶

A

B

C

Q值

1.3%

12.5%

0.1%

   

Ⅵ.实验结论:                                                                      

 

 0  63517  63525  63531  63535  63541  63543  63547  63553  63555  63561  63567  63571  63573  63577  63583  63585  63591  63595  63597  63601  63603  63607  63609  63611  63612  63613  63615  63616  63617  63619  63621  63625  63627  63631  63633  63637  63643  63645  63651  63655  63657  63661  63667  63673  63675  63681  63685  63687  63693  63697  63703  63711  170175 

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