(18分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝色或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

 

 

 

 

 

 

 

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有一个酶II的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来____,理由是:________________________________。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也是最有效的方法是________。

(3)从分子水平上,检测绿色荧光蛋白基因是否插入到猪胎儿成纤维染色体的DNA上,检测方法是____________,检测绿色荧光蛋白基因是否表达,检测方法是____________。

(4)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为表达载体上的________。获得的转基因猪,可以解决的医学难题是可以避免________________。

 

(5分)根据实验原理和材料用具,设计实验选择载体质粒,明确质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素类别。

①实验原理:作为载体的质粒,须有标记基因,这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌,其质粒才可用作载体。

②材料用具:青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

③方法步骤

    第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并标为1、2、3号,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1mL蒸馏水、青霉素液、四环素液,并使之分布在整个培养基表面。

    第二步:将接种环在酒精灯上灼烧,并在酒精灯火旁取菌种,对三个培养皿分别接种。

    第三步:将接种后的三个培养皿放入37℃恒温箱培养24h。

④预期结果:

①____________________________________;

②____________________________________;

③____________________________________;

④____________________________________;

⑤____________________________________。

 

 0  62869  62877  62883  62887  62893  62895  62899  62905  62907  62913  62919  62923  62925  62929  62935  62937  62943  62947  62949  62953  62955  62959  62961  62963  62964  62965  62967  62968  62969  62971  62973  62977  62979  62983  62985  62989  62995  62997  63003  63007  63009  63013  63019  63025  63027  63033  63037  63039  63045  63049  63055  63063  170175 

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