（多选）下列属于基因运载体所必须具有的条件是  （     ）

A、具有某些标志基因               B、具有环状的DNA分子

C、能够在宿主细胞内复制         D、具有多种限制性内切酶

（多选）下列关于体内受精和早期胚胎发育的叙述，错误的是：（   ）

A.哺乳动物的卵泡是在出生前形成的

B.在自然条件下，受精是在子宫内完成的

C.内细胞团是在原肠胚期形成的

D.桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能

（多选）基因工程中，构建基因表达载体时（   ）

A.需要加入启动子、终止子、标记基因、目的基因等元件

B.目的基因只能从目的生物中获取

C.启动子将启动表达载体的复制

D.剪切中形成的末端都可由T4 DNA连接酶连接

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。若限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在质粒上有酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。

②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来? ＿＿＿＿＿。理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用，因此GFP基因可以运用作为基因表达载体上的＿＿＿＿＿＿。

（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。然后还要通过＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。

（4）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（5）早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等物质。

（6）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于＿＿＿＿＿＿生殖。目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：＿＿＿＿＿＿(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

(1)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请根据图回答下列问题：

①请用箭头把代表各图解的字母按单克隆制备过程的顺序连接起来。

②在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的特性。

③由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的动物细胞工程技术手段。

(2)金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种。请据图回答：

①获得b并将b连接到a上形成c，常用到的酶有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

②通过植物组织培养技术可快速、大量培养该抗病新品种，请简述此技术的基本流程。＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

胚胎干细胞在基础生物学研究和临床应用方面具有重要价值。下图是胚胎干细胞获取方法图解。

（1）早期发育的胚胎分为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿几个主要阶段。（2）C、D细胞分别为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，它们的形态特性是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）胚胎干细胞有何应用前景?（说出两例）。＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）我国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，请你谈谈为什么要反对克隆人? ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。

(1)进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。再在37℃，5％CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天左右看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎＿＿＿＿期开始的标志。

(2)如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。该种方法在动物新品种选育中的显著优点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

(3)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

(4)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，小鼠丙的基因来源于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿,该项操作中将小鼠甲体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中而不直接用小鼠甲的体细胞进行培育的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

下列关于细胞知识的叙述，不正确的是（    ）

A．ATP是所有细胞可直接利用的能源物质

B．分裂期的细胞内mRNA的水平比分裂间期的要高

C．淋巴细胞既有分化的潜能又有自我更新能力

D．细胞膜功能的复杂程度，主要取决于膜上的蛋白质的种类和数量

利用右下图所示的实验装置进行与光合作用有关的实验。下列叙述正确的是（    ）

A．试管中收集到的气体总量等于光合作用产生的氧气总量

B．在相同的温度条件下产生氧气的量肯定相同

C．用不同浓度的NaHCO₃溶液进行实验，可以探究CO₂浓度对光合作用的影响

D．为了探究光照强度对光合作用的影响，用一套装置慢慢向光源靠近，观察气泡产生的速率的变化

在证明DNA是遗传物质的实验中，赫尔希和蔡斯分别用³²P和³⁵S标记噬菌体的DNA和蛋白质，在下图中标记元素所在部位依次是（    ）m

A．①、④         B．②、④        C．①、⑤        D．③、⑤