(16分)下面是在农杆菌Ti质粒基础上构建的植物抗虫基因表达载体的示意图。请据图回答:

(1)为了扩大基因表达载体的数量,需将基因表达载体再植入农杆菌中并对农杆菌进行培养,此时,在培养农杆菌的培养基中应加入              ,该培养基按用途划分属于

(2)带有抗虫基因的农杆菌进入棉花细胞后,要检测抗虫基因是否插入到棉花的染色体DNA上,常用的方法是               ;要检测抗虫基因在棉花体内是否翻译成蛋白质,必需先从转基因棉花中提取蛋白质,再用相应的   方法来确定是否已形成毒蛋白;如果在个体水平上鉴定抗虫基因是否转化成功,可以通过   实验来实现。

(3)Ti质粒的分子大小有200kb(千碱基对)左右,然而能进入植物细胞的只有一小部分约25kb(称为T—DNA)。在这一小部分的两端各有一个25bp(碱基对)长的重复序列LB和RB,这两个序列对这一小部分DNA进入植物细胞是不可缺少的。实验证明只要Ti质粒上保留了这两个序列,即使这两个序列之间的其它序列被不同程度地改变(如插入一个外源DNA片段),这一小部分也仍然可以转移并整合到植物的基因组中。

①  在构建的T—DNA过程中,还应该具有和  等结构,才能保证进入植物体的抗虫基因能够顺利表达。

②Ti质粒不同于其它质粒的最大特点就是它含有T—DNA,如果给你一个不含T—DNA的质粒,你如何把它构建成含有T—DNA的质粒?               

 

 0  60920  60928  60934  60938  60944  60946  60950  60956  60958  60964  60970  60974  60976  60980  60986  60988  60994  60998  61000  61004  61006  61010  61012  61014  61015  61016  61018  61019  61020  61022  61024  61028  61030  61034  61036  61040  61046  61048  61054  61058  61060  61064  61070  61076  61078  61084  61088  61090  61096  61100  61106  61114  170175 

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