蛋白质工程的说法正确的是(    )

A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接操作

B．蛋白质工程目前成功的例子已经很多

C．蛋白质工程能制造出自然界中不存在的全新蛋白质

D．蛋白质工程的起点是一段RNA序列，终点是得到改造的蛋白质

有关治疗性克隆叙述错误的是(    )

A．核移植胚胎干细胞经过诱导分化，可以形成相应的组织、器官，用于移植

B．可以将患者的体细胞核植入去核的受体卵母细胞中，获得重组细胞

C．治疗性克隆的结果说明高度分化的体细胞仍具有全能性

D．治疗性克隆中包含的技术有胚胎干细胞培养技术和核移植技术

在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草的过程中，下列操作错误的是(    )

A．用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸

B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C．将重组DNA分子导入烟草原生质体

D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

下列有关基因工程的叙述正确的是(    )

A．从cDNA文库中获取的目的基因有启动子，无内含子　       　　

B．平末端是限制酶在所识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的

C．将目的基因导入植物细胞时，用Ca²⁺处理细胞使细胞处于感受态

D．E.coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末段之间连接起来

下列有关动物细胞传代培养到10—50代时，说法正确的是(    )

A．此时用胰蛋白酶处理，作用对象是组织块

B．细胞增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止

C．细胞核型都不发生变化

D．继续传代时，大部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性

回答有关PCR的问题：（1）多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：         

A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现

B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

 (2)图示样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增，可以获取大量DNA克隆分子。

请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：

①                                                                        

②                                                                        ③                                                                        。

（3）你打算扩增下图所示的两段序列之间的 DNA ，请从所列出引物中选出合适的一对，

5’-GACCTGTGGAAGC  CATACGGGATTG-3’

3’-CTGGACACCTTCG  GTATGCCCTAAC-5’

引物 1                        引物 2

5’-GACCTGTGGAAGC        5’-CATACGGGATTG

5’-CTGGACACCTTCG        5’-GTATGCCCTAAC

5’-CGAAGGTGTCCAG        5’-GTTAGGGCATAC

5’-GCTTCCACAGGTC        5’-CAATCCCGTATG

答：引物 1 ：                         ；    引物 2 ：                        

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程。请回答：

（1）过程①代表的是         。

（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用                     两种工具酶。

（3）过程③采用的实验技术是        ，获得的X是            。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的          所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行核酸比较；或用图中的                           进行特异性结合检测。

已知鸡的成熟红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素。用编码上述两种蛋白质的基因作探针，分别对两种细胞中提取的总DNA片段进行杂交，结果显示为实验一；分别对两种细胞中提取的总RNA片段进行杂交，结果显示为实验二：

注：＋为阳性结果；一为阴性结果

（1） 实验一结果表明：                                                    ；

实验二结果表明：                                                    。

（2）试分析：成熟红细胞合成β珠蛋白而不合成胰岛素的原因是：                        

                                                            。

（3）在实验二的DNA分子探针杂交实验中碱基配对的原则是                      。

（4）试判断：合成蛋白质的遗传密码是否在探针上，并说明理由：               ，

                                            。

转基因食品的安全性目前已成为人们争论的焦点之一,但这样并不能阻止转基因技术应用于生产实践的种种尝试，转基因小牛的诞生就是其中的一例。

人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术，将人们的血清白蛋白基因导入乳牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：

A．将人的血清白蛋白基因导入雌奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①

B．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中形成重组细胞②

C．电脉冲刺激重组细胞②，促使其形成早期胚胎

D．将胚胎移植到母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。

（1）重组细胞①是通过转基因技术，实现了奶牛胚胎细胞中的DNA与_______________重组。

（2）重组细胞②是通过___________工程中的_____________技术，使重组细胞①的细胞核与去核牛卵细胞的细胞质融合。

（3）若将早期的胚胎分离成若干个胚胎细胞。让其分别发育成一头小牛，这些小牛的基因型________（完全相同. 部分相同.完全不同），这是因为________________________。

（4）利用转基因牛乳汁提取药物工艺简单，甚至可直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛尿液生产提取药物比乳汁提取药物有更大优越性：处于不同发育时期的  　　　　　  性动物都可生产药物。

动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。

(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞                               。

(2)气室中充入5％ C0₂气体的主要作用是                               。

(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的            ，以保证抗生素对肝脏无害。

(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具：

肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。

实验过程：

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。

上表中还需进行的操作是____                                          ___ 。

③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察___          ____  ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明    ____           。