海洋中的发光细菌具独特的生理特性,可作为环境监测的指标生物。

    I.(1)对发光细菌纯化、培养常用                法接种(答一种)。实验结束后。对使用过的培养基应进行        处理。

(2)通过PCR技术扩增发光基因的三个步骤是:                

    Ⅱ.现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测,请完善下列实验设计并回答问题:

    实验原理:细菌代谢正常时,发光强度稳定:当重金属影响到其代谢时,发光会受到抑制,抑制程度用抑光率(发光被抑制的百分率)表示。

    实验材料:明亮发光杆菌冻干粉、待测海水水样、2%NaCl溶液、3%NaCl溶液、荧光分光光度计(用于测定细菌发光强度)、试管等。

    实验步骤:

(1)配制发光菌悬液:将少许明亮发光杆菌冻干粉和0.5mL 2%NaCl溶液加入5mL小试管中,摇匀。

(2)抑光反应:按照下表配制海水样品稀释液。

组别

1

2

3

4

5

3%NaCl溶液(ml)

 

4.74

4.49

4.24

3.99

海水样品(ml)

 

0.25

0.50

0.75

1.00

发光菌悬液(ml)

 

0.01

0.01

0.01

0.01

混合液中海水浓度(%)

 

0.05

0.10

0.15

0.20

        ①l号试管中应加入:3%NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为          mL。

②各试管静置15min后,                   

(3)计算相对抑光率:按照公式T%=            计算各组相对抑光率。

(4)如果测得上述各组相对抑光率如下

组别

1

2

3

4

5

相对抑光率(%)

0

6

13

17

23

①请绘制随海水浓度变化相对抑光率的变化曲线。

②根据结果可以判断待测样品               

 

 0  60512  60520  60526  60530  60536  60538  60542  60548  60550  60556  60562  60566  60568  60572  60578  60580  60586  60590  60592  60596  60598  60602  60604  60606  60607  60608  60610  60611  60612  60614  60616  60620  60622  60626  60628  60632  60638  60640  60646  60650  60652  60656  60662  60668  60670  60676  60680  60682  60688  60692  60698  60706  170175 

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