（8分）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG 单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：

（1）制备单克隆抗体过程中要用到____________和____________技术。

（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG 相当于__________，使小鼠产生分泌相应__________的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的__________免疫。

（3）在B 淋巴细胞内DNA 合成有D 和S 两条途径，其中D 途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA 合成没有S 途径。

①利用DNA 合成途径不同的特点配制的HAT 培养基含有多种成分，其中添加的__________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________________________。

（4）此过程生产的单克隆抗体可以与________________特异性结合，从而诊断早孕。

（6分）.下图表示“华恢1号”抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

(1)杀虫基因通过①～④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做　     　　　。

(2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点)，据图分析：

①人工改造质粒时，要使抗虫基因能成功表达，还应插入　　     　　。

②人工改造质粒时，用限制酶Ⅰ处理，其目的是：第一，去除质粒上的　　　　  　　　　(基因)，保证T－DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于　　　　　　　　　　　　　　　。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的情况是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

 (3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是　　　 　　　。

（14分）据调查，随着化学农药的产量和品种逐年增多，害虫的抗药性也不断增强，造成的危害很严重，如近年来，棉铃虫在我国大面积暴发成灾，造成严重经济损失。针对这种情况，经研究发现寄生在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白，它能使寄主至死而对人畜无害。我国科技工作者已成功地将该毒蛋白基因导入棉花植株体内并实现表达。由于棉铃虫吃了这种“转基因抗虫棉”就会死亡，所以该种棉被推广后，收到了很好的经济效益。

    请据以上材料，回答下列问题：

⑴害虫抗药性的增强是__________________________的结果。

⑵抗虫棉的具体培育过程包括                          、                          、

                             、                             。                               

（3）该项技术的遗传学原理是                                           （    ）

A．基因突变       B．基因重组 Ｃ．基因复制     Ｄ．基因分离

（4）利用下面技术可获得抗虫基因。如：从苏云金芽孢杆菌核糖体上分离出            ，

并以此为模板，        成互补的单链DNA，然后单链DNA在酶的作用下合成                 。

（5）要使抗虫基因与质粒结合，必须用               来切割基因载体和目的基因，切割后的质粒与目的基因片段还需要              酶，根据              原则使两者粘合在一起。

（6）抗虫棉之所以能抗虫，是因为棉花细胞中的抗虫基因表达出                              。

（7）该科技成果在环保上的重要作用是  ___________________________________________。

（6分）应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，②过程常用的方法是___________________。

（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是___________细胞，Ⅲ代表的细胞所分泌的物质具有________________________的特点。

（3）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是____________________，⑤过程采用的技术是___________。

（4）下面是获取目的基因的几种方法，其中需要模板的是（    ）

①从基因组文库中获取目的基因                      ②利用PCR技术扩增目的基因

③构建cDNA文库                                   ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因

A．①②                 B．②③              C．①③                        D．①④

（14分）请回答有关下图的问题：

（1）图中①～⑤所示的生物工程为                     。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对           的修饰或合成，对现有的进行改造，或制造出一种新的                ，以满足人类生活的需求。

（2）图中序号④所示过程叫做              ，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是           （请将模板碱基写在前）

（3）若大量扩增目的基因，则用的是           技术（写出全称），该过程需要的聚合酶的特点是                。

（4）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，在图中⑨过程之前，要对精子进行筛选， 保留含性染色体            的精子。

（5）为获得较多的受精卵进行研究，图中⑥过程一般用激素对供体做           处理。为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对             动物做             处理。若图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到             期方能受精。

（6）用胚胎分割技术处理发育到              期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将             均等分割。

20世纪70年代，创立了一种新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是

A. 定向提取生物体的DNA分子             B. 定向地对DNA分子进行人工剪切

C. 在生物体外对DNA分子进行改造         D. 定向地改造成生物的遗传性状

有关基因工程的叙述正确的是

A．DNA聚合酶可连接磷酸二酯键，因此可代替DNA连接酶来进行连接

B.不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，充分体现了酶的专一性

C.载体上的抗性基因的主要作用是提高受体细胞在自然环境中耐热性

D.载体的作用是可以完成目的基因的转运、扩增、表达、确定在染色体上基因间的排列顺序

下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是

A. 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键

B. 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键

C. 连接两条DNA链上碱基之间的氢键

D. 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

D. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

基因工程是在DNA分子水平上进行设计的。在基因工程的基本操作步骤中，不进行碱基互补配对的是：

A. 人工合成目的基因                     B. 目的基因与载体结合

C. 将目的基因导入受体细胞               D. 目的基因的检测与鉴定