番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

（1）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做          。

（2）从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了                 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

（3）普通番茄细胞导入目的基因后，经③过程形成       ，然后诱导出试管苗，进一步培养成正常植株。

（4）如图甲，获得目的基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的      处，DNA连接酶作用于       处。（填“a”或“b”）

（5）如图乙是该目的基因表达过程中的一个阶段，图中3和4的核苷酸相同否？   

说明理由                                              。

通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等。请据图甲、表乙回答问题：

表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况

（1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新成新的植物体的原因是____________________。

（2）由植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中[    ]________和[    ]___________过程。

（3）应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是___________。

（4）从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的二种重要物质。其中，新芽形成必须的条件是                           ；而在培养形成完整新个体过程中，对它们的调控关键是                                       。

植物细胞原生质体的制备是植物体细胞杂交、原生质体转化等技术的基础。下图表示利用机械法和酶解法制备原生质体的简要过程，请据图回答：

（1）将植物叶片放在较高浓度的蔗糖溶液中，一段时间后，在细胞的细胞壁和细胞膜之间充满了___________，原因是______________________。

（2）机械法是指剪碎已经发生质壁分离的组织时，有些细胞只被剪去细胞壁，释放出完整原生质体的方法。使用这种方法，蔗糖溶液浓度对获得原生质体的数量和活性有很大影响，浓度过低会造成___________，易剪碎原生质体；浓度过高，则会使___________。

（3）用酶解法制备原生质体的过程中，一般使用___________处理叶片。与机械法相比，酶解法的优点是_________________________________。

研究性学习小组参观某市市郊建立的以沼气为中心，以保护生态环境为目标的“猪—沼—鱼—肥—果蔬”生态模式时绘出了如下模式图，请分析回答：

（1）构建以沼气为中心的“猪—沼—鱼—肥—果蔬”生态模式时主要依据的生态学原理  是                 　，该生态系统最大的优点是　　    　         　     。

（2）该生态系统的“基石”是　    ，若要生产3kg鸡肉最少需要水稻和大豆共　　kg。

（3）沼气池中的产甲烷菌在生态学上的作用主要是                      　     。

（4）若农田内有害虫发生，采用何种措施既能保护环境又能有效防治害虫？（写出2种）

（5）从生态系统的物质循环分析，焚烧秸秆对农田生态系统的影响是________________，焚烧秸杆主要破坏了生态工程的哪一原理？__________________。

基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。

下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题：

（1）写出下列字母和编号的名称：A：         ； II：          。

（2）将A和B形成D所需的酶是        。⑤过程中为提高成功率，常用        溶液处理大肠杆菌。

（3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有        特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落        （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是                                        。

胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：

（1）应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于               ，为一次获得多个细胞B，往往需要向供体2内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是                                     。

  （2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是                                    。

  （3）通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是                。

  （4）应用3中的细胞D取自囊胚的           ，细胞C取自牛胎儿的            。

  （5）应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是            。

下图为培育转基因小鼠的部分过程示意图。请回答下列问题：

（1）若需在短时间内获得较多的外源基因，通常采用        技术。

（2）图中的A细胞通常为      细胞，将外源基因导入该细胞常用的方法是          。

（3）仔鼠出生后可用其尾巴进行DNA检测，通过         方法，检测出携带外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相应的蛋白质，可从转基因小鼠中提取蛋白质，并用相应的抗体进行       杂交，若有杂交带出现，则表明小鼠体内的外源基因            。

（4）在外源基因导入小鼠的A细胞时，外源基因可能随机地插入到该细胞的DNA中。这些细胞有的能发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析外源基因插入后导致有些A细胞死亡的最可能原因                                                。

现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题：   

 Ⅰ．实验原理：                                                 。

根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。

 Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。

 Ⅲ．实验步骤：

 （1）制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

 （2）进行细胞培养。

①取A、B、C 3个洁净的培养瓶，                        ；

②A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；

③                                                        

（3）制作临时装片。

①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，                                    ，3min~5min后，盖上盖玻片。

（4）镜检和统计。

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于             期的细胞，并与                  进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）。

Ⅳ．结果分析与结论：

（1）经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是                                        。

（2）在实验中，C培养瓶起         作用，C瓶的Q值说明                    。

下列有关酶的制备和应用叙述正确的是 

A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶

B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化

C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤

D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层

对基因表达载体构建的相关说法错误的是

A．需要限制酶和DNA连接酶参与       B．基因表达载体中含有启动子和内含子

C．通常用抗生素基因作为标记基因         D．基因表达载体的构建是基因工程的核心