鸡的输卵管细胞能合成卵清蛋白，红细胞能合成β—珠蛋白，胰岛细胞能合成胰岛素。用编码上述蛋白质的基因分别做探针，对三种细胞中提取的总DNA用限制酶切割形成的片段进行杂交实验；另用同样的三种基因探针，对上述三种细胞中提取的总RNA进行杂交实验，上述实验结果如下表(“＋”表示杂交过程中有杂合双链“—”表示杂交过程没有杂合的双链)：

下列是表中①到⑥中填写的内容，其中正确的是                         

A．＋－＋－＋＋                    B．＋－＋＋＋＋   

C．＋＋＋－－－                    D．－－－－＋＋

下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制备“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法不正确的是

A．要将重组质粒导入细菌B首先要把细菌细胞处理为感受态细胞

B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的细菌必定是导入了重组质粒的细菌

C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，导入了重组质粒的细菌必定能生长

D．“工程菌” 制备成功的标志是 “工程菌”能合成出人的生长激素

基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块基片表面固定序列已知的八核苷酸的探针，当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列TATGCAATCTAG（过程见图1）。若某一靶核酸序列与八核苷酸的探针杂交后，荧光强度最强的探针位置如图2所示，请推理分析溶液中该靶核酸序列为

A．ATCGACTT                      B．TAGCTGAA

C．AGCCTAGCTGAA                 D．TCGGATCGACTT

（14分）以下是关于生物工程技术的应用实例。据题回答：

Ⅰ．1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。为使基因表达载体能顺利进入大肠杆菌，一般需将大肠杆菌用____________处理，以增大其细胞壁的___________。基因表达载体随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，其中的胰岛素基因在大肠杆菌内表达的标志是__________________（2分）。

Ⅱ．利用基因工程，可以使哺乳动物的乳腺成为一种“生物反应器”，生产大量药用蛋白。这种动物基因工程操作的一般过程是：

（1）首先，将______________与______________等调控组件重组在一起；

（2）然后，通过_____________的方法，导入哺乳动物的受精卵中；

（3）再次，将受精卵送入母体内，使其生长发育为转基因动物。从中选择_______性个体，待其进入泌乳期后，可以在其分泌的_______中来提取所需要的药用蛋白。

Ⅲ．继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。

（1）通常要将外源基因转入____   中，原因是____   （2分）；

（2）通常采用____   技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组；

（3）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的____  细胞中特异表达。

（8分）根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI （作用于G A A T T C序列）酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒。回答以下问题：

（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：

        ……A T A G C A T G C T A T C C A T G A A T T C G G C A T A C……

        ……T A T C G T A C G A T A G G T A C T T A A G C C G T A T G……

     红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：

        ……T C C T A G A A T T C T C G G T A T G A A T T C C A T A C……

        ……A G G A T C T T A A G A G C C A T A C T T A A G G T A T G……

 其中，           DNA分子（填甲或乙）含有“目的基因”， 另一个 DNA分子即是“质粒”。

 （2）用剪刀代表酶的切割。酶切位点在         （a处还是b处），此化学键称为               。请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。（2分）

 （3）你模拟插入的DNA片断能称得上一个基因吗？             。（填能或不能）

（4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的受体菌的群体。按照其中所含基因量的多少又可分为               文库和              文库。

（8分）以下是关于哺乳动物受精和早期胚胎发育的描述，回答问题：

  （1）精子的尾由______演变而成；雄性动物刚刚排出的精子，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力，这一生理现象称为_________。

  （2）获能的精子穿越放射冠和透明带，进入卵黄膜完成受精作用，会产生两次生理反应，阻止其他精子入卵，它们是__________、____________________。

  （3）受精作用结束后，受精卵在输卵管内进行有丝分裂，开始发育。胚胎发育的早期称为__________期；根据胚胎形态的变化，可将早期发育的胚胎分为受精卵-------->__________-------->__________-------->__________-------->幼体。

（10分）科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：

（1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与________细胞融合，形成__________细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于_____________（2分），可大量制备。

（2）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用_____________诱导融合。

（3）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是________________（2分）。

（4）科学家通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，然后导入到鼠淋巴细胞中，这个过程中用到的工具酶有__________、__________，鼠—人嵌合抗体的生产过程属于________工程的范畴。

（10分）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶___________和限制酶___________分别对___________（2分）和质粒进行切割。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有______作为标记基因。

（3）研究人员通常采用___________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用___________（2分）技术。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的___________和___________过程。

细胞学说建立于19世纪，揭示了细胞的统一性和生物体结构的统一性，下列符合细胞学说的是(　　)

①一切动植物都由细胞发育而来

②病毒没有细胞结构

③细胞通过分裂产生新细胞

④细胞分原核细胞和真核细胞两大类

⑤细胞是一个相对独立的单位

⑥一切动植物都由细胞和细胞产物所构成

A．①③⑤⑥  　　 B．②④⑤     C．③④⑤  　　 D．①②③④⑤

下列各项组合中，能正确体现生命系统由简单到复杂层次的是(　　)

①核酸　②神经元　③呼吸道的上皮　④病毒　⑤胃  ⑥一只野兔　⑦同一片森林中

的所有野兔　⑧一片草地中所有的昆虫　⑨一片果园

A．①④②③⑤⑥⑧⑨            B．②③④⑦⑧⑥⑨

C．②④③⑤⑧⑥⑨              D．②③⑤⑥⑦⑨