(6分)下图是动物细胞工程过程中相关的技术操作过程,请据图回答下列问题:

(1) 在操作一中,为了使细胞彼此分离,通常是先用剪刀剪碎组织,再用消化法将细胞分开,消化法用的消化酶是胰蛋白质酶,或胶原酶。研究表明胶原蛋白酶和胰蛋白酶在消化时的机制有差异,下表为两种酶活性的比较表。

项目

胰蛋白酶

胶原酶

消化特性

适用于消化软组织

适用于消化纤维多的组织

用量

0.01%~0.5%

0.1~0.3 mg/ml

消化时间

0.5~2小时

1~12小时

pH

8~9

6.5~7.0

作用强度

强烈

缓和

细胞影响

时间过长时有影响

时间长时无大影响

动物血清

有抑制作用

无抑制作用

Ca2和Mg2

有抑制作用

无抑制作用

 据表中信息可知胰蛋白质酶作用时间需限制在0.5~2小时,原因是____________________________________,为了控制胰蛋白酶的消化作用时间,常用消化临界时向溶液中直接加入________即可使酶灭活而终止消化。操作一的原理是__________________。

(2) 动物细胞培养液配制好后,通常还要先抽取少许放入培养瓶中,置于37℃、CO2培养箱中24小时后观察,这样做的目的是__________________________。

(3) 在动物细胞培养过程中通常要对细胞进行计数,计数的细胞数应为活细胞数。某同学在细胞培养的一次测定中,首先振荡摇匀培养液并立即吸细胞悬液少数向一试管中滴入细胞悬液9滴,再滴入台盼蓝(活细胞染液)1滴,混匀。再从试管中取混合液向计数板边缘轻轻滴1~2滴已染色的细胞悬液,使之充满计数板和盖玻片之间间隙,经测定计数室每小格中活细胞数平均为3个,则原每毫升培养液中含有的活细胞数应为________个。

(4) 科研人员研究发现某一种抗原刺激机体后,在鼠体内可发现有多种效应B细胞都可产生针对于该特定抗原的抗体,这些抗体混合在一起即为多克隆抗体。试从抗原结构的角度分析产生该现象的原因是____________________________________。

 

(9分)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题:

图1 转基因操作流程图

表2 几种限制酶识别序列及切割位点表

(1) 获取真核生物的基因通常采用人工合成法,通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的,如果要将耐盐碱基因和质粒重组,应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列,这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。

(2) 过程②采用PCR技术扩增目的基因时,在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质,若目的基因扩增4代,则共用了引物Ⅰ________个。

(3) 请画出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的过程:__________________________。

(4) 图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌,而是先将其导入大肠杆菌,目的是____________________。

(5) 在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达,通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。

(6) 假设该抗盐碱基因D,通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上,则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。

 

(10分)阅读下列材料,回答有关问题:

科学家发现在两栖类的某些蛙中,雄性个体的性染色体组成是XY,雌性个体的性染色体组成是XX。如果让它们的蝌蚪在20℃左右发育时,雌雄比率约为1∶1;如果让这些蝌蚪在30℃左右发育时,不论具有何种性染色体组成,蝌蚪都发育成雄性。

(1) 请你推测温度(30℃)改变这种蛙性别的原因:

① 可能是只改变性别的表现型;② 可能是________。

若是后者,该变化是否会一定遗传给后代?________。(会、不会、不一定)

(2) 若温度(30℃)只改变性别的表现型,两只XX的蝌蚪分别在30℃和20℃条件下发育成青蛙,能否交配产生后代?________________。若不能写出理由,若能请写出交配后产生的后代在20℃条件下的性别是________。

(3) 若要证明以上两种推测哪一种正确,科研人员设计了以下实验,请完善实验:

Ⅰ. 材料、用具:用一双亲产生的适量的蛙受精卵、相同的饲料、显微镜、各种试剂等。

Ⅱ. 实验步骤:

① 取同一双亲产生的适量的蛙受精卵,平均分成两份,处理:

实验组甲和对照组乙的处理分别是:________________。

② 在每个组中随机选取若干只成蛙编号(如1~20,要求样本足够大),分别从其体内选取有分裂能力的细胞经过分散处理后,再进行______________,最后制成装片;

③ 在显微镜下观察________________时的________________并进行统计;

④ 预期实验结果并进行实验分析:

a. 实验预期:若甲、乙两组实验的装片被观察到蛙细胞的性染色体组成均是XX∶XY≈1∶1;

结果分析:略

b. 实验预期:________________;结果分析:________。

 

 0  53658  53666  53672  53676  53682  53684  53688  53694  53696  53702  53708  53712  53714  53718  53724  53726  53732  53736  53738  53742  53744  53748  53750  53752  53753  53754  53756  53757  53758  53760  53762  53766  53768  53772  53774  53778  53784  53786  53792  53796  53798  53802  53808  53814  53816  53822  53826  53828  53834  53838  53844  53852  170175 

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