科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—GGATCC— ,限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—GATC—,据图回答:

(1)过程①所需要的酶是     

(2)在构建基因表达载体过程中,应用限制性核酸内切酶     切割质粒,用限制性核酸

内切酶    切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________    原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是            

(3)在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理,以增大     的通透性,使含有

目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。

(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果(黑点表示菌落),能够生长的细菌中已导入了            ,反之则没有导入;再将灭菌绒布按到培养基a上,使绒布表面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图b的结果(空圈表示与a对照无菌落的位置)。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是                ,这些细菌中导入了________________。

(5)图中的重组质粒的组成除了目的基因、标记基因外,还必须有               

 

请回答胚胎工程和细胞工程方面的问题:

(1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精__________、________________以及在母体中发育和产出等过程。

(2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其__________。另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和__________。

(3)随着转基因成果的不断涌现,人们对转基因生物是否安全表现出了担忧,在    安全、     安全和环境安全三个方面发生了激烈的争论。

(4)将胚胎干细胞置于成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态。在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的    ,加入抗生素是为了         ,这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

(5)在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是    

(6)单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出                    ,第二次筛选出                                

(7)通过体细胞核移植技术,从患者自身上取出体细胞,将其细胞核植入去核的卵母细胞,从而获得早期人类胚胎,然后再从中培育“患者自身的”胚胎干细胞供医学临床使用的技术叫做“                 ”。这一技术也可以用来研究“克隆人”,中国政府对生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是:                 不接受任何生殖性克隆人的实验。

 

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