研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答

1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                          ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为        。

2.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                。

3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是              ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是    ，这 两种酶作用的化学键都是          。

4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用　　 　　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

6.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　                               　    　。

7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组，并将重组质粒导入原本无amp^R和tet^R  的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌，现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___       _____ ，图三结果显示，多数大肠杆菌内导入的是___            __。

请分析回答下列有关遗传问题：

Ⅰ、果蝇是常用的遗传研究材料。

1.如果将果蝇的一个具有分裂能力的体细胞放在含32P标记的脱氧核苷酸培养液中，在第二次细胞分裂的中期，发现一条染色单体中只有一条脱氧核苷酸链具有放射性，则其姐妹染色单体有         条脱氧核苷酸链具有放射性。

2.果蝇的某一对相对性状由等位基因（R，r）控制，其中一个基因在纯合时能使合子致死（注：RR，XrXr，XrY等均视为纯合子）。有人用一对果蝇杂交，得到F1代果蝇共185只，其中雄蝇63只。若F1代雌蝇仅有一种表现型，则致死基因是__________，F1代雌蝇基因型为_________。

3.下图所示果蝇与隐性类型的雄果蝇测交，产生子代基因型为Aaee的几率是40%，则该果蝇A-e或a-E间的交换值是                       。

4. 若A(a)和E(e)这两对基因共同控制果蝇翅膀的颜色，A-E-为黑色，a a e e 为白色，其余为灰色。如果如图的雌果蝇与翅色基因型相同的雄果蝇进行杂交，所生后代中，产生灰色翅的个体占后代的比例为                    。

Ⅱ、下图为甲、乙、丙三种遗传病在某家族中的遗传系谱图。已知甲病为伴X遗传病，4号、5号个体不携带甲、乙、丙 三种遗传病的致病基因。请分析回答：(假设连锁基因不发生互换)

5.甲病为伴X         性遗传病，在乙、丙的致病基因中能与甲致病基因遵循自由组合规律的是       。

6.如果Ⅱ5与Ⅱ6再生一个小孩，则该小孩正常的概率是             ；如果Ⅱ8与Ⅱ9再生一个男孩Ⅲ16，则该 小男孩同时患有乙、丙两种病的概率为         ；

孔雀石绿(C₂₃H₂₅N₂Cl)常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图所示。

请分析并回答：

1.从①到③的培养过程中培养液应加入                      作为唯一碳源，此过程的目的是                                。

2.使用         法接种可以在④上获得单个菌落，接种时的关键是“无菌”；确保无菌的方法有       （写出3种）；实验中使用的培养基和培养皿需要高压蒸汽灭菌法进行灭菌，高压蒸汽灭菌的要求是                               ，因为此条件下可以杀死包括芽孢在内的所有微生 物。

3.从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A，从生物进化的角度分析，这是　　的结果。菌株A在生态系统成分中属于                   。

4.研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如图。

由上述结果可以看出，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有     　　作用，唯有Pb²⁺的作用相反。若要排除Pb²⁺本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置          的培养基样本作为对照。

研究小组利用样方法对校园中三个群落进行物种多样性调查，结果如图1示：

1.图2为群落1中物种数量与样方面积之间的关系，则正确的取样面积应为            。

2.A、B、C、D之间的形态差异属于生物多样性中的            多样性。

3.请比较三个个群落的生物多样性高低（大小），并说明理由                        。

在一个海岛上，一种海龟中有的脚趾是连趾（ww），有的脚趾是分趾（WW、Ww），连趾便于划水，游泳能力强，分趾则游泳能力较弱。若开始时，连趾和分趾的基因频率各为0.5，当海龟数量增加到岛上食物不足时，连趾的海龟容易从海水中得到食物，分趾的海龟则不易获得食物而饿死，若干万年后，基因频率变化成W为0.2，w为0.8。请问：

1.该种群中所有海龟所含的基因称为该种群的           。基因频率变化后，从理论上计算，海龟种群中连趾占整个种群的比例为          ；分趾的海龟中杂合子占整个种群的比例为         。

2.导致海龟种群的基因频率发生变化的原因是什么？                            。

3.这种基因频率的改变，是否产生了新的物种？请简述理由                      。

农药等污染物有致畸、致癌和致突变效应，潜在危害大。致畸主要表现之一是细胞分裂间期的微核现象（如右图），微核与主核有相同染色效果，但体积较小。可通过观测统计微核率的大小，认识和评估污染物对生物的影响。请就农药污染程度对植物细胞微核产生的效应开展研究。

（1）材料用具：培养皿，5%、10%、15%、20%的磷胺（农药）溶液，……（其他实验器具和药品试剂省略）。

（2）假设：                                                 

（3）主要方法步骤：

①对蚕豆种子浸种，在适宜条件下萌发生根。

.②                                                                       

③ 一段时间后，取出已生根的种子后用蒸馏水冲洗，并移至蒸馏水中再培养一定时间 ，            

（写出制作根尖临时装片的主要步骤和所有试剂）。

④镜检并记录、统计微核。

（4）请制作微核数据记录表。

（5）最可能的结果是：                                             。

将小狗的甲状腺切除，并向体内注射适量生长激素，其结果是小狗

A.生长正常，发育异常                B.生长异常，发育正常

C.生长发育都异常                    D.生长发育都正常

下列有关生命的物质基础和结构基础的阐述，正确的是

A. 噬菌体的组成元素一定含有C、H、0、N、P、S

B.原核生物的RNA可通过自我复制或转录合成

C. 真核细胞代谢所需要的酶都分布在生物膜上

D. 细胞中的有机物是在不断变化的，无机物是稳定不变的

在适宜条件下，水解后最终只能产生同一种产物的是

A．淀粉      B．脂肪酶      C．豆油       D．脱氧核糖核酸

图中a、b、c是不同的生物类群或生物，下列叙述合理的是

A．a—原核生物、b—细菌、c—流感病毒

B．a—原核生物、b—细菌、c—乳酸菌

C．a—真核生物、b—植物、c—蓝藻

D．a—真核生物、b—真菌、c—大肠杆菌