海洋中的发光细菌具独特的生理特性，可作为环境监测的指标生物。
I.（1）使用 法（答二种），可在固体培养基上获得单菌落，纯化发光菌株。
（2）细菌这类微生物在基因工程中有重要应用，试列举其中一项。
II．现利用发光细菌对海水重金属污染程度进行生物毒性监测，请完善下列实验设计并回答问题：
实验原理：细菌代谢正常时，发光强度稳定；当重金属影响到其代谢时，发光会受到抑制，抑制程度用抑光率（发光被抑制的百分率）表示。
实验材料：发光菌悬液、可能受重金属污染的待测海水水样、3%NaCl溶液、荧光分光光度计（用于测定细菌发光强度）、试管等。
（1）实验步骤：按下表配制待测海水样品稀释液。
|
组 别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
3%NaCl溶（mL） |
|
4.74 |
4.49 |
4.24 |
3.99 |
|
海水样品（mL） |
|
0.25 |
0.50 |
0.75 |
1.00 |
|
发光菌悬液（mL） |
|
0.01 |
0.01 |
0.01 |
0.01 |
|
混合液中海水浓度（%） |
|
0.05 |
0.10 |
0.15 |
0.20 |
请完善实验步骤：
①1号试管中应加入：3％NaCl溶液、海水样品、发光菌悬液分别为 mL（3分）。
②各试管静置15min后， 。
（2）计算相对抑光率：按照公式T％= 计算各组相对抑光率。
（3）如果测得上述各组相对抑光率如下：
|
组别 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
相对抑光率（%） |
0 |
6 |
13 |
17 |
23 |
①请绘制海水浓度对相对抑光率影响的曲线（3分）。
②根据结果可以判断待测海水样品 。
